丰富环境对脑缺血再灌注损伤后脑血流和血管新生的影响

摘要

本文从以下几个部分展开论述：
　　第一部分 丰富环境干预对脑梗塞大鼠脑血流恢复和脑血管新生的影响
　　目的:既往研究证实，缺血性脑梗塞后的血流恢复及血管再生对脑功能的改善有重要作用。本实验拟探讨丰富环境干预是否能改善脑卒中后血管新生和脑血流的改善。
　　方法:将SD大鼠随机分为3组:假手术组、丰富环境组和标准环境组，并进行大脑中动脉梗塞手术，其中假手术组除不堵塞血管这一步骤，其余步骤与手术组相同。在缺血前和缺血1小时分别运用激光散斑技术检测各组大鼠大脑中动脉供血区皮层的相对血流速度，然后将手术后的大鼠分别放入相应的环境中饲养4周，4周后再次检测同一区域皮层相对血流速度。另有大鼠干预4周后经大鼠尾静脉注入异硫氰酸荧光素右旋糖苷(Fluorescein Isothiocyanate dextran，FITC-dextran)，5分钟后断头取脑，固定后切片，通过激光共聚焦扫描显微镜检测缺血干预后的血管密度。同时，运用免疫印记(Westernblot)技术检测缺血侧大脑皮层血管内皮生长因子(VascularEndothelial Growth Factor， VEGF)的表达。
　　结果:与缺血前比较，丰富环境组和标准环境组缺血侧皮层的相对血流速度在缺血1小时后明显下降(P＜0.01)，假手术组无明显变化。干预4周后，与标准环境组相比，丰富环境组的缺血侧皮层血流速度明显增加(P＜0.05)。另外，丰富环境干预4周后的大鼠缺血侧皮层的血管密度明显大于标准环境组，VEGF蛋白表达也明显高于标准环境组。
　　结论:丰富环境可以增加缺血后大鼠的缺血侧皮层血流，血流的增加可能与丰富环境促进了VEGF的表达从而增强血管再生有关。
　　第二部分 丰富环境干预后的大鼠血清对氧糖剥夺后脑微血管内皮细胞增殖作用的影响
　　目的:血管新生是成人脑缺血后血管生成的最主要方式，也是现如今研究的主要方向;脑微血管内皮细胞是主要的脑血管组成成分，对脑缺血后的血管新生及其重要。本项研究将探讨丰富环境干预后大鼠的血清对氧糖剥夺后脑微血管内皮细胞的增殖作用。
　　方法:丰富环境及标准环境干预同前，干预后大鼠心脏采血，离心后取上清，过滤后备用。培养脑微血管内皮细胞，实施氧糖剥夺实验以复制体外脑缺血模型。而后进行预实验，用10％、20％和40％浓度的不同干预血清分别培养氧糖剥夺后的脑微血管内皮细胞，用CCK-8测定其增殖，摸索最适浓度。最后，用最适浓度血清多次重复培养氧糖剥夺后的脑微血管内皮细胞，进一步探讨丰富环境干预后大鼠的血清对氧糖剥夺后的脑微血管内皮细胞的增殖作用。
　　结果:10％浓度的干预血清培养氧糖剥夺后的脑微血管内皮细胞，其CCK-8检测的OD值明显大于20％和40％浓度的干预血清(P＜0.01);10％浓度丰富环境干预的大鼠血清培养氧糖剥夺后的脑微血管内皮细胞，其CCK-8检测的OD值明显大于标准环境干预的大鼠血清的CCK-8值(P＜0.01)。
　　结论:10％浓度的干预血清对氧糖剥夺后的脑微血管内皮细胞的促增殖作用最明显;10％浓度丰富环境干预的大鼠血清对氧糖剥夺后的脑微血管内皮细胞的促增殖作用明显优于同浓度标准环境干预的大鼠血清。

目录

英文缩略词表

前言

第一部分 丰富环境干预对脑梗塞大鼠脑血流恢复和脑血管新生的影响

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

第二部分 丰富环境干预后的大鼠血清对氧糖剥夺后脑微血管内皮细胞增殖作用的影响

摘要

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述 丰富环境对血管新生影响的研究进展

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在读期间发表论文

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致谢

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