烟台地区富士苹果环斑花叶病毒分子变异研究

摘要

苹果花叶病是苹果病毒病之一。我国是世界上主要的苹果生产大国，苹果产业给国家和农民带来了可观收益。但我国苹果单产低、品质差，在国际市场上竞争力不足的缺点日益明显，病毒病是导致这些问题的关键因素。有人通过对苹果花叶病病原的研究，得出ApMV可能不是引起苹果花叶病的唯一病原，可能存在其他病原。苹果花叶病毒危害十分严重，是金冠、秦冠和富士等苹果品种危害最严重的病毒之一，寄主范围广泛，ApMV除了侵染苹果外，还可自然侵染花红、山楂、樱桃、梨、木瓜、桃、月季等蔷薇科植物。本研究通过参考设计李世访文献病毒PNRSV的引物对烟台几个地区进行RT-PCR检测并进行分子变异分析，发现回收病毒序列与新发现病毒ApNMV序列相似度较高；从而可以明确ApNMV在不同寄主、不同地域的分子变异情况，为病毒分类、诊断、流行规律的认识以及防治提供依据。研究结果如下：
　　1、苹果花叶症状的表现：该病在叶片上表现为明亮的淡黄色斑点或者花叶症状，这些花叶症状在有些品种叶片上表现为小的环状黄色斑点遍布整个叶片，有的表现为大的不规则、连续的褪绿斑，严重的表现为叶脉也表现为失绿症状。
　　2、苹果花叶病对不同品种叶绿素含量的影响研究：发现极早熟富士A的正常叶叶绿素总量比病叶叶绿素总量高38.72％，相差幅度最大；烟富6的正常叶叶绿素总量比病叶叶绿素总量高14.80%，相差幅度最小；整体差值范围为14.80%～38.72%。苹果花叶病对不同品种光合作用的影响研究：发现正常叶净光合速率与病叶净光合速率差值比率在2.93%～45.83%之间。正常叶气孔导度与病叶气孔导度差值比率在-0.02%～72.09%之间。正常叶胞间CO2浓度与病叶胞间CO2浓度差值比率在2.56%～34.97%之间。正常叶蒸腾速率与病叶蒸腾速率差值比率在7.81%～57.12%之间。
　　3、对烟台不同地区表现花叶性状叶片进行ApNMV病毒分子变异检测的研究结果：
　　（1）将从烟台的栖霞，蓬莱，牟平三个地区采集的69个感染花叶的叶片样品，用RT-PCR方法进行ASGV、ACLSV、ASPV、ASSV、ApNMV、ApMV病毒检测。每个病毒在各个地区总的侵染率为ASSV（40.57%）＞ASPV（37.68%）＞ACLSV（30.43%）＞ASGV（28.98%）＞ApNMV(27.54%）＞ApMV（0%）。ApNMV的携带率为栖霞杨础镇33.33%、蛇窝泊镇0%；牟平观水镇22.22%、水道镇16.67%、昆嵛镇22.22%；蓬莱村里集55.56%、大庄44.44%、刘沟镇22.22%。
　　（2）从烟台栖霞，蓬莱，牟平三个地区采集的样品中，分离获得了9条ApNMV病毒变体，9条变体序列均与日本LC108995.1分离物序列相似性高，同源性为97.0%～98.0%。通过对各地区变异序列与ApNMV，APMV（L03726.1）， PNRSV（L38823.1）病毒序列构建进化树比较发现，烟台三个地区的目的条带序列与ApNMV亲缘关系最近，与ApMV，PNRSV亲缘关系较远。

目录

声明

1 绪论

1.1 引言

1.2 苹果病毒病的特征

1.3 苹果病毒病的主要危害

1.4 苹果病毒病的传播途径

1.5 苹果病毒病的检测技术

1.6苹果花叶病的研究

1.7当前的主要脱毒技术

1.8研究的目的及意义

2 材料与方法

2.1 对表现花叶性状叶片叶绿素含量的测定

2.2 对不同品种正常叶与病叶光合作用强度的测量

2.3 对烟台不同地区表现花叶性状叶片进行病毒分子变异的研究

3 结果与分析

3.1 不同苹果品种花叶症状的表现

3.2 苹果花叶病对不同品种叶绿素含量的影响

3.3 苹果花叶病对不同品种光合作用影响

3.4 烟台地区富士苹果环斑花叶病毒分子变异研究

4 结论与讨论

4.1 苹果花叶病对不同品种叶绿素含量的影响

4.2 苹果花叶病对不同品种光合作用的影响

4.3 对烟台不同地区表现花叶性状叶片进行病毒分子变异的研究结果

4.4 创新点

参考文献

附录

致谢