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长期配戴角膜接触镜者角膜上皮的病理改变

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摘要

目的:
   通过对比的方法,研究长期配戴角膜软性接触镜患者和从未配戴角膜软性接触镜患者的角膜上皮,观察角膜上皮组织的基底细胞数目、上皮厚度、基底细胞形态、PCNA等方面的不同变化,了解长期配戴角膜软性接触镜对角膜的影响,从而为临床提供有效的治疗手段。
   方法:
   1.选择患者:选配戴角膜接触镜超过三年的患者和从未配戴角膜接触镜患者各33例。
   2.实验分组:
   (1)实验组:配戴软性角膜接触镜超过三年的患者33例66眼;
   1)实验A组:配戴软性角膜接触镜超过三年的患者30例60眼,其中男性13例26眼,女性17例34眼,年龄18-41岁,平均27.38±5.66岁;
   2)实验B组:配戴软性角膜接触镜超过三年的患者3例6眼,其中男性1例2眼,女性2例4眼;
   (2)对照组:从未配戴角膜接触镜患者33例66眼;
   1)对照A组为从未配戴角膜接触镜患者30例60眼,其中男性15例30眼,女性15例30眼,年龄18-40岁,平均26.87±6.73岁;
   2)对照B组为从未配戴角膜接触镜患者3例6眼,其中男性2例4眼,女性1例2眼。
   3.取材:对所选患者,在准分子Flap-free Epi-LASIK手术中,用Epi-K角膜上皮刀取下角膜上皮瓣。
   4.检测(A组患者):
   (1)厚度测量:将角膜上皮瓣展开,平放在载玻片上,采用超声方法测量其厚度;
   (2)基底细胞计数:
   1)角膜上皮瓣经过HE染色、固定、脱水、透明、封片后,在显微镜下观察其基底细胞数目的变化;
   2)将新鲜角膜上皮瓣经瑞氏染色,在显微镜下观察其基底细胞数目的变化。
   5.形态学观察(B组患者):
   1)取角膜上皮瓣,经过固定、脱水、透明、包埋、切片、HE染色、固定、脱水、透明、封片后在病理显微镜下观察角膜上皮瓣及其细胞形态的变化;
   2)取角膜上皮瓣,常规切片,经免疫组织化学染色后,在高倍显微镜下进行增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA)测定。
   结果:
   1.通过超声测量离体角膜上皮瓣的厚度,长期配戴角膜软性接触镜组角膜上皮层厚度为55.33±4.56μm;对照组角膜上皮层厚度为57.19±3.82μm,二者之间有显著差异,存在统计学意义(p<0.05)。
   2.通过显微镜下对离体角膜上皮瓣基底细胞的观察,发现长期配戴角膜软性接触镜组,基底上皮细胞数目减少,为3872.57±153.16个/mm2;对照组基底上皮细胞数目为3989.18±289.58个/mm2,二者之间有显著差异,存在统计学意义(p<0.01)。
   3.通过形态变化的对比,可以见到长期配戴软性角膜接触镜者角膜基底细胞细胞排列疏松,细胞形态欠规整,基底膜较厚,相对粗糙。
   4.经过免疫组织化学标记,长期配戴软性角膜接触镜者角膜上皮基底细胞发现PCNA阳性细胞,而从未配戴软性角膜接触镜者没有发现。
   5.用Epi-K取下的角膜上皮瓣基底细胞完整,界面光滑平整,无基底细胞缺失,无基质细胞存在。
   结论:
   1.长期配戴软性角膜接触镜可导致角膜上皮损伤:使角膜上皮厚度变薄;单位面积内的的角膜上皮基底细胞数量减少;可使角膜上皮的组织结构发生病理学改变,细胞形态发生改变,细胞之间的连接和基底膜遭到破坏,PCNA阳性细胞存在。
   2.Epi-K角膜上皮刀可分离出完整的角膜上皮瓣,既不会有上皮细胞残留,也不会损伤前弹力层,更不会损伤基质层,可以保留光滑的平面以备准分子激光切削。证实了Epi-K角膜上皮刀在准分子激光表面切削手术中有其独特的优越性。

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