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白念珠菌野生型CYP51及H310D、T311A突变型CYP51的克隆、表达及活性初步测定

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英文缩略词表

前言

第一部分白色念珠菌H310D、T311A突变型CYP51的克隆

材料和方法

结果

讨论

第二部分白色念珠菌H310D、T311A突变型CYP51的表达

材料和方法

结果

讨论

第三部分白色念珠菌H31 0D、T31 1 A突变型CYP51活性的初步测定

材料和方法

结果

讨论

总结

参考文献

致谢

综述

参考文献

附录

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摘要

该课题选取白色念珠菌标准株Y01.09作为野生型CYP51酶的来源.根据计算机模建CYP51蛋白结构,选取羟基化反应中心的与质量传递有关的两个氨基酸残基H310、T311,采用重组PCR技术,将其突变为310D、311A,考察H310D、T311A突变型CYP51在功能上的变化,尤其是其与氮唑类化合物亲和力的变化,从而证明H310、T311在CYP51酶中的重要作用.该课题分三部分完成.第一部分:野生型CYP51及H310D、T311A突变型CYP51的克隆;第二部分:野生型CYP51及H310D、T311A突变型CYP51酶的表达;第三部分:野生型CYP51与H310D、T311A突变型CYP51酶的活性测定.

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