前列腺癌中自然突变的雄激素受体的功能研究

摘要

前列腺癌(prostate cancer, PC)是雄激素依赖性的肿瘤.临床实践及体外细胞培养实验都证实,雄激素可以促进PC细胞的增殖,而通过内分泌疗法降低体内的雄激素水平或拮抗其作用可抑制肿瘤生长并可诱导肿瘤细胞凋亡,因此内分泌治疗是临床中晚期PC的首选疗法;其方法包括手术去势(切除睾丸)、化学去势(使用雌激素、孕激素等抑制垂体分泌促性腺激素,从而减少雄激素的产生),以及使用雄激素拮抗剂(如CPA、Flutamide等)来对抗体内残留的肾上腺来源的雄激素等.该实验室曾应用PCR-SSCP及双链DNA循环测序法,对50余例PC患者肿瘤组织的AR基因进行了突变筛选,并检测出5种AR基因点突变(G142V、D221H、S296R、E872Q、M886I),其中G142V、D221H、S296R位于ARN端的转录激活区(TAD),E872Q、M886I位于AR C端的配体结合区(LBD).由于此5种点突变均位于AR的功能区,并且其所属的5例病人都是恶性程度较高的雄激素非依赖型PC患者,因此对这5种AR点突变进行功能分析,将为阐明AR基因突变对AR功能的影响及在PC发生、发展和治疗中的作用提供重要依据.

目录

Abbreviations

前 言

第一部分AR突变体S296R表达载体的构建、表达及配体结合特性的研究

材料和试剂

方法

实验结果

一.AR突变体S296R表达载体的构建

二.AR突变体S296R表达载体在COS-7细胞中的表达

三.完整细胞中AR的放射配体分析

讨论

第二部分AR突变体S296R转录激活功能的研究

材料和试剂

方法

实验结果

一.甾体激素对AR突变体S296R转录激活功能的影响

二.共调节因子对AR突变体S296R转录激活功能的影响

讨 论

第三部分AR突变体（G142V、D221H、S296R、E872Q、M886I）在PC3细胞中功能研究

材料和试剂

方法

实验结果

讨论

小 结

参考文献

附录 生化试剂及配制

文献综述

致 谢