他莫昔芬和腺病毒转染对瘢痕疙瘩成纤维细胞p53表达及细胞周期影响的实验研究

摘要

目的:分离并培养6例患者的瘢痕疙瘩成纤维细胞,取培养6代的细胞进行实验.①构建p53腺病毒载体系统.②检测他莫昔芬和携带p53基因片段的重组腺病毒转染单独应用及联合应用后,瘢痕疙瘩成纤维细胞P53蛋白和p53基因表达的改变及其变化规律,以及相应的细胞周期变化.③观察瘢痕疙瘩成纤维细胞P53蛋白和p53基因表达的改变与细胞周期变化之间的对应关系.④观察联合应用他莫昔芬和携带p53基因片段的重组腺病毒转染对细胞生长的抑制是否具有协同作用.方法:①构建腺病毒载体系统并转染瘢痕疙瘩成纤维细胞.②瘢痕疙瘩成纤维细胞分为四组,他莫昔芬和携带p53基因片段的重组腺病毒转染单独及联合应用后,分别应用RT-PCR以及Western Blot方法检测瘢痕疙瘩成纤维细胞P53蛋白和p基因表达的变化,以单纯瘢痕疙瘩成纤维细胞做对照.③流式细胞仪检测各组细胞细胞周期的变化.结论:他莫昔芬和携带p53基因片段的重组腺病毒转染均可使瘢痕疙瘩成纤维细胞的P53蛋白和p53基因表达显著增加,导致瘢痕疙瘩成纤维细胞生长抑制,使细胞大量停滞于G<,>0、G<,1>期.他昔莫芬和携带p53基因片段的重组腺病毒转染的联合应用效果要明显优于他莫昔芬和携带p53基因片段的重组腺病毒转染的单独应用.

目录

研究背景

参考文献

第一部分携带p53基因片段的重组腺病毒载体构建和转染

实验一、携带p53基因片段的重组腺病毒载体构建

1.材料方法

2.结果

3.讨论

参考文献

实验二、重组腺病毒载体转染瘢痕疙瘩成纤维细胞

1、材料和方法

2.结果

3.讨论

参考文献

实验小结

综述

致谢