PC12细胞、稳定表达TrkA的Cos-7细胞在神经生长因子刺激下的蛋白质组学研究及褪黑素对多巴胺能神经元的保护作用

摘要

第一部分稳定表达TrkA的Cos-7细胞株在NGF刺激下的蛋白质组学研究目的:通过NGF刺激稳定表达TrkA的Cos-7细胞株,建立一种人工神经细胞分化的人工模型,寻找与神经细胞分化相关的蛋白质.方法:用50ng/ml的NGF刺激稳定表达TrkA的Cos-7细胞株,观察0,1,3,5天的形态学变化;免疫组织化学检测Cos-7细胞MAP-2蛋白质的表达;经Western blot方法用4G10抗体检测酪氨酸磷酸化蛋白;双向电泳比较分化前后Cos-7细胞全裂解液的蛋白质变化.结论:人工模型Cos-7细胞可用于研究神经细胞分化的机制,有70个蛋白可能参与了Cos-7细胞的分化过程,32个蛋白在NGF刺激后含量升高5倍以上,38个蛋白在NGF刺激后含量降低5倍以上.第二部分PC12细胞在NGF刺激下分化前后的蛋白质组学研究;目的:寻找与PC12细胞株神经细胞分化相关的蛋白质.方法:利用双向电泳技术,对比50ng/ml浓度下NGF刺激3天后分化良好的PC12细胞与未分化的PC12细胞蛋白质表达的不同.结论:116个蛋白质可能参与了PC12细胞株的神经分化过程.第三部分褪黑素对多巴胺能神经元的保护作用;目的:观察褪黑素对体外培养的大鼠胚胎中脑多巴胺能神经元存活率的影响.方法:取孕龄14天大鼠胚胎中脑多巴胺能神经元细胞体外培养,加入10<'-10>—10<'-5>M的褪黑素,24小时后观察存活细胞数.结果:在褪黑素浓度为10<'-5>—10<'-8>M时,存活细胞数明显多于对照组,差异具有显著性.结论:褪黑素对多巴胺能神经元具有保护作用.

目录

缩略语中、英文对照

第一部分稳定表达TrkA的Cos-7细胞株在NGF刺激下蛋白质组学研究

1前言

2材料与方法

3结果

4讨论

参考文献

第二部分PC12细胞在NGF刺激下分化前后的蛋白质组学研究

1前言

2材料与方法

3结果

4讨论

参考文献

第三部分褪黑素对多巴胺能神经元的保护作用

综述一：蛋白质组学在临床医学中的应用

一、蛋白质组学研究的意义

二、蛋白质组学的工具和技术

三、蛋白质组学技术在生物医学上的应用

四、蛋白质组学技术目前的缺陷

五、展望

参考文献

综述二：Neurotrophin及其受体介导的信号转导通路的研究进展

综述三：褪黑素的脑保护作用

总结与展望

博士期间已发表和待发表文章目录

致谢