中药活性成分对肝星状细胞基质金属蛋白酶抑制剂1表达及调控作用机制的研究

摘要

肝纤维化是细胞外基质(ECM)的异常过度沉积所致的一种病理改变，具可逆性。近年来大量研究表明，局部基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂(TIMPs)的比例不平衡是造成ECM沉积的主要原因。　　本文研究了蛋白激酶C(PKC)激活剂佛波醇酯(PMA)、抑制剂Ro31-8220、芹菜素和漆黄素以及中药活性成分大黄素对TIMP-1mRNA和蛋白的表达的影响，同时构建含有TIMP-1启动子AP-1位点的报告基因分析这些药物是否通过AP-1位点调控TIMP-1表达，以探讨药物作用的可能机制以及PKC在TIMP-1表达中的作用。结果提示：大黄素、芹菜素和漆黄素可能通过抑制TIMP-1的表达成为抗肝纤维化药物并可能逆转肝纤维化；蛋白激酶C在肝脏星状细胞TIMP-1表达中起重要作用；大黄素抑制TIMP-1表达主要通过影响JunD表达和启动子AP-1位点起作用。

目录

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中英文摘要

ABBREVIATION

前 言

一、实验材料与试剂

二、实验方法

三、实验结果

(一)细胞因子和佛波醇酯对TIMP-1表达的影响

(二)大黄素、芹菜素和漆黄素对TGF-β1诱导的HSC-T6细胞TIMP-1mRNA表达及蛋白表达的影响

(三)大黄素、芹菜素和漆黄素对佛波醇酯诱导的HSC-T6细胞TIMP-1mRNA表达及蛋白表达的影响

(四)PKC抑制剂Ro 31-8220对佛波醇酯诱导HSC-T6细胞TIMP-1蛋白表达的影响

(五)大黄素对佛波醇酯诱导的HSC-T6细胞JunD mRNA表达的影响

(六)大黄素对HSC-T6细胞核蛋白与TIMP-1启动子AP-1结合的影响

(七)报告基因法研究药物对TIMP-1启动子AP-1活性的影响

讨论

结论

参考文献

致 谢

报告基因在药物研究中的应用