术中冰冻切片诊断乳腺癌前哨淋巴结微转移的实验研究

摘要

目的:
　　 探讨术中采用冰冻切片(frozen section,FS)联合快速免疫组化法(RIHC)诊断乳腺癌前哨淋巴结(SLN)微转移(MMs)的临床价值,为乳腺癌SLN微转移的术中诊断提供一个新思路。通过分析SLN微转移与月经状态、肿瘤分期、组织学类型、肿瘤位置、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及人类表皮生长因子受体-2(HER-2)表达状态之间的关系,进一步探讨SLN微转移对乳腺癌患者预后的影响。
　　 方法:
　　 研究对象为2009年12月至2010年12月在济南军区总医院甲状腺乳腺外科诊治的51例女性乳腺癌患者,所有患者均符合2010年乳腺癌临床指南所推荐的前哨淋巴结活检(SLNB)条件。术中采用美蓝+核素(99mTc-Dx)联合法定位乳腺癌SLN,将其切除后立即送病理学检查。SLN按长轴分成两半,一半行冰冻切片检查,以100μm为间隔,连续切取3个层面,每个层面切片3张,切片厚度为5μm;每个层面先取1张切片行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色,检测SLN癌转移的情况。如果SLN经H-E染色查见癌转移,则术中对患者施行腋窝淋巴结清扫术(,ALND);SLN未查见癌转移则继续将每个层面的另外2张切片行快速免疫组化染色,检测指标为广谱细胞角蛋白(pan-cytokeratin,pan-CK)及上皮膜抗原(EMA)。染色后如为阳性行ALND,阴性则根据患者情况选择相应的手术方式。术后将另一半SLN行石蜡包埋,常规病理切片检测转移状态,切片间隔、张数、厚度及检测方法均与术中冰冻切片相同。比较术中两种检测方法诊断SLN癌转移的灵敏度、特异度、总符合率及假阴性率,对术后常规石蜡切片检测SLN癌转移率与术中检测情况进行统计学分析,并分析SLN微转移与月经状态、肿瘤分期、组织学类型、肿瘤位置、激素受体状态、HER-2状态之间的相关性,统计学方法均采用X2检验。
　　 结果:
　　 51例女性乳腺癌患者成功行SLNB,共检出SLN120枚。联合法定位SLN的符合率为96.1％,成功率为100％。每例患者检出SLN1～5枚,平均2枚,所有SLN均位于腋窝外侧组。共检出腋窝淋巴结643枚,每例患者10～22枚,平均13枚;共检出内乳淋巴结76枚,每例患者0～11枚,平均1枚。4例患者冰冻切片H-E染色查见癌转移,47例H-E染色阴性者继续行快速免疫组化染色检出微转移者8例。冰冻切片检测SLN癌转移率为7.8％(4/51),冰冻切片联合快速免疫组化染色检测SLN癌转移率为23.5％(12/51)。两者的灵敏度、特异度、总符合率和假阴性率分别为30.8％vs92.3％、100％vs100％、82.4％vs98.0％、69.2％vs7.7％。快速免疫组化染色的操作时间呈现良好的学习曲线,平均时间为30分钟。术后常规石蜡切片检测SLN癌转移率为25.5％(13/51),优于冰冻切片及冰冻切片联合快速免疫组化染色(X2=6.21,P＜0.05)。SLN微转移与月经状态、肿瘤分期、组织学类型、肿瘤位置、激素受体状态及HER-2状态无明显相关性(P＞0.05)。
　　 结论:
　　 1.SLN术中冰冻切片H-E染色虽然在临床上广泛应用,但其检测SLN癌转移率较低,且存在灵敏度低、假阴性率高的缺点。
　　 2.与术中冰冻切片H-E染色相比,冰冻切片联合快速免疫组化染色明显提高了SLN微转移的检出率,减少了假阴性率。
　　 3.乳腺癌SLN微转移与患者月经状态、肿瘤分期、组织学类型、肿瘤位置、激素受体状态及HER-2状态无明显相关性。
　　 4.术中冰冻切片联合快速免疫组化染色能快速、准确地检测乳腺癌SLN微转移。