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HGF基因转染骨髓间质干细胞联合Fn预涂支架体外构建组织工程心脏瓣膜的实验研究

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第一部分 HGF基因重组腺病毒载体Ad.HGF的构建

材料

方法

结果

讨论

参考文献

附图

第二部分BMSCs的培养、鉴定及Ad.HGF转染BMSCs后HGF蛋白表达、分泌

材料

方法

结果

讨 论

参考文献

第三部分预涂Fn及转染HGF基因联合应用对BMSCs与支架材料相互作用、再细胞化以及组织重塑的影响

材料

方法

结果

讨论

参考文献

全文总结

组织工程心脏瓣膜研究进展

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摘要

目的:观察HGF基因转染和支架预涂Fn对骨髓间质干细胞与支架相互作用的影响。方法:(1)HGF基因重组腺病毒载体Ad.HGF的构建;(2)骨髓间质干细胞(BMSCs)的分离、培养及Ad.HGF转染BMSCs后HGF蛋白表达和分泌;(3)预涂Fn和HGF基因转染联合应用对细胞与支架之间相互作用的影响。结果:Ad.HGF转染BMSCs 2天后HGF蛋白明显表达、分泌。Fn蛋白预涂联合应用HGF基因转染BMSCs后,HGF以时间依赖性模式促进BMSCs与Fn蛋白的粘附。对构建物进行组织学观察,第2周表面见大量细胞覆盖,第3周表面见松散细胞层,第4周表面见单层融合细胞,第6周出现二层结构,第8周呈现三层结构。免疫组化分析,第8周构建物中出现内皮细胞和肌成纤维细胞。整体构建的TEHV经受体外脉动高速流体冲刷后,内皮细胞仍保留较完整。结论:预涂Fn联合HGF基因转染BMSCs能促进种子细胞在去细胞猪主动脉瓣膜上的粘附、再内皮化和组织重建。

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