胰、十二指肠同源盒基因-1对β-catenin信号通路的调节机制研究

摘要

β-连环蛋白(β-catenin)是Wnt信号通路的关键效应分子，其下游靶基因c-myc在胰岛细胞中过表达能显著降低胰岛细胞中Insulin的表达水平，使小鼠产生严重的糖尿病而死亡。pdx1 基因是最重要的胰腺发育调控因子，直接参与胰腺发育和正常生理功能调节。本研究发现PDX1对β-catenin报告基因及c-myc转录水平的负性调节作用，并证实这种调节作用与β-catenin基因自身的转录与亚细胞定位无关，而是通过降低β-catenin/TCF4/P300转录复合体的稳定性和抑制该复合体与下游靶基因启动子区特异位点之间的结合来实现。成熟胰岛细胞中PDX1通过负性调节β-catenin信号通路活性来抑制细胞过度增殖和凋亡，进而维持细胞正常生理功能。 另外，还结合激光俘获显微切割和荧光实时定量PCR技术进行了人肝内胆管细胞癌组织和正常胆管上皮组织中成熟小RNA表达及其功能的研究。发现44个在肿瘤组织中异常表达的小RNA及多组与肿瘤临床生物学特征密切相关的小RNA。证实mir-320和mir-204表达能显著下调MCL-1和BCL-2的蛋白水平，有效提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。

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第一部分PDX1蛋白对β-catenin信号通路的调节机制研究

引言

材料和方法

实验结果

一、PDX1下调c-myc基因启动子的转录活性

二、PDX1能够特异的抑制β-catenin介导的转录活性

四、RNA干扰PDX1导致β-catenin信号通路的活化

五、PDX1第1-209位氨基酸对维持其转录抑制功能是必须的

六、TCF4的表达拮抗PDX1对β-catenin信号的抑制作用

七、PDX1通过抑制c-Myc的表达调节细胞的增殖和凋亡

讨论

参考文献

第二部分人肝内胆管细胞癌中小RNA表达谱的研究

引言

材料和方法

实验结果

讨论

参考文献

小结

附录

致谢