Obestatin在胃肠手术治疗2型糖尿病中的作用及机制研究

摘要

2型糖尿病已成为世界范围内的流行疾病，至今全球2型糖尿病患者超过1.5亿，估计2025年达到3亿。虽然近来有报道提示严格控制高血糖可以降低2型糖尿病的并发症，治疗方法包括饮食控制、体育锻炼、改变不良生活习惯、口服降糖药或使用胰岛素等，但很少能使患者血糖完全恢复正常。 目前外科手术是最为有效且持续的减重方法，而接受减重手术的2型糖尿病患者大多数在术后能够获得良好的血脂控制并同时获得糖尿病改善的收益，这些患者术后能够部分甚至完全停用降糖药物，包括胰岛素。目前已有足够证据说明至少在病态性肥胖患者、外科手术是治疗其糖尿病的有效手段。 2型糖尿病不仅是肥胖的一个独立危险因素，同时也与脂代谢异常、冠心病、高血压等代谢综合症的重要危险因素密切相关。一些既在2型糖尿病发病中起重要作用，又与肥胖症密切相关的食欲和体重调节激素、脂肪细胞因子、炎症因子等成为近年来关注的焦点之一。 Ghrelin发现于1999年，主要由胃内X/A样细胞产生(占全身的20％)，其主要的生理功能是通过启动摄食、增进食欲、增加营养物质吸收、增加葡萄糖的利用、减少脂动员以及促进脂肪形成等多方面的机制诱导机体的正向能量平衡，促进脂肪沉积、体重增加。Obestatin发现于2005年11月，与ghrelin源于同一基因和前体原(preproghrelin)，主要由胃内A样细胞产生，初步研究认为其在机体食欲、胃肠功能和体重调节中与ghrelin的作用相反，且其受体GPR39与ghrelin受体GHSR亦属于同一G蛋白偶联受体家族，提示二者有可能互相制约、共同调控机体能量和代谢平衡。 当前关于obestatin与ghrelin关系的研究仍有众多争议，而他们与手术治疗2型糖尿病的关系未见文献报导。因此，本研究拟从以下几个方面探讨ghrelin、obestatin与2型糖尿病及减重手术的关系，以期为目前相关问题的解决提供一些新的思路：①肥胖合并2型糖尿病患者胃肠手术前后外周血ghrelin、obestatin水平变化及意义；②正常体重2型糖尿病患者胃肠手术前后外周血ghrelin、obestatin水平变化及意义；⑨不同减重手术方式对肥胖大鼠外周血ghrelin、obestatin水平的影响及意义；④不同减重手术方式对2型糖尿病大鼠(Goto-Kakisaki rats)外周血及组织中ghrelin、obestatin水平的影响及意义。 第一部分：肥胖合并2型糖尿病患者胃肠手术前后外周血ghrelin、obestatin水平变化及意义 目的：探讨肥胖合并2型糖尿病患者接受胃肠手术前后循环中ghrelin和obestatin水平的变化及其与2型糖尿病的关系。 方法：采用RIA法检测16例肥胖合并糖尿病患者和11例单纯性肥胖患者MiniBypass或LAGB术前及术后1月外周血ghrelin、obestatin水平；同时检测血糖、胰岛素、糖化血红蛋白(HbAlc)、C肽。 结果：肥胖合并糖尿病患者Mini-Bypass手术后血糖低于LAGB手术(P＜0.05)、胰岛素高于LAGB手术(P＜0.05)；所有肥胖患者手术后ghrelin和obestatin水平均明显高于术前(P＜0.05)，而ghrelin/obestatin比值变化无统计学意义。相关分析显示术前obestatin水平与空腹胰岛素和HOMA-IR呈正相关(P＜0.05)，与其它指标间相关性无统计学意义。 结论：术后ghrelin和obestatin的升高可能是肥胖患者体重下降的原因或体重下降之后的反馈性结果。 第二部分：正常体重2型糖尿病患者胃肠手术前后外周血ghrelin、obestatin水平变化及意义 目的：探讨正常体重2型糖尿病患者接受胃肠手术前后循环中ghrelin和obestatin水平的变化及其与2型糖尿病的关系。 方法：采用RIA法检测9例正常体重糖尿病患者和20例正常体重非糖尿病患者胃次全切除或局部胃切除术前及术后10日外周血ghrelin、obestatin水平；同时检测血糖、胰岛素、糖化血红蛋白(HbAlc)、C肽。 结果：胃大部切除后正常体重糖尿病患者血糖降低(P＜0.05)、胰岛素升高(P＜0.05)，糖尿病患者和非糖尿病患者术后ghrelin及obestatin均有所下降(P＜0.01)，而ghrelin/obestatin比值变化无统计学意义。相关分析显示Ghrelin与空腹胰岛素和HOMA-IR之间呈负相关(P＜0.05)，与其它指标间相关性无统计学意义。 结论：Ghrelin水平的降低可能是术后糖尿病改善的原因之一。 第三部分：不同减重手术方式对肥胖大鼠ghrelin、obestatin水平的影响及意义 目的：通过肥胖大鼠胃肠道手术动物模型，观察不同术式对手术效果的影响及ghrelin和obestatin在其中的变化。 方法：35只肥胖SD大鼠及35只普通SD大鼠分别接受袖状胃切除术、迷你胃旁路术及胃旁路术后随访12周，观察体重变化并检测术前、术后4周和术后12周外周血ghrelin、obestatin水平。 结果：MGBP手术死亡率低于SG和RYGBP(P＜0.05)：在高脂饮食诱导的肥胖大鼠中RYGBP与MGBP减重效果相似且优于SG组(P＜0.05)，正常体重大鼠ghrelin、obestatin与体重正相关而ghrelin/obestatin比值与体重负相关(P＜0.05)，肥胖大鼠ghrelin/obestatin比值与体重负相关(P＜0.05)。 结论：大鼠手术中MGBP安全性高于SG和RYGBP，大鼠ghrelin和obestatin水平与体重呈正相关。 第四部分：不同减重手术方式对GK大鼠ghrelin、obestatin水平的影响及意义 目的：通过2型糖尿病大鼠(Goto-Kakisaki rats)动物模型，观察不同胃肠道手术方式对糖尿病治疗的影响及实验动物循环中ghrelin与obestatin的水平变化并探讨其可能的作用机制。 方法：40只GK大鼠分别接受袖状胃切除术、迷你胃旁路术、胃旁路术、全胃切除术和假手术，术后观察5周，测定进食量、饮水量、体重，检测术前、术后2周及术后5周时外周血ghrelin、obestatin水平。 结果：SG、MGBP、RYGBP、TG等术式均能够降低GK大鼠空腹血糖(P＜0.01)；TG术后进食量下降最多(P＜0.05)，RYGB和TG术后体重下降最多(P＜0.05)；术后GK大鼠糖耐量仍然异常，TG组血糖最高(P＜0.05)，TG组术后ghrelin最低(P＜0.01)，未发现ghrelin、obestatin及ghrelin/obestatin比值与体重、进食量或空腹血糖相关。 结论：Ghrelin和obestatin主要由胃部产生，全胃切除后GK大鼠糖尿病出现继续加重。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：主要英文缩写及中英文对照

声明

研究背景

第一部分：肥胖合并2型糖尿病患者胃肠手术前后外周血ghrelin、obestntin水平变化及意义

第二部分：正常体重2型糖尿患者胃肠手术前后外周血ghrelin、obestntin水平变化及意义

第三部分：不同减重手术方式对肥胖大鼠外周血ghrelin、obestntin水平的影响及意义

研究背景

材料与方法

结果

讨论

主要参考文献

第四部分：不同减重手术方式对2型糖尿病大鼠（GK rats）外周血及组织中ghrelin、obestatin水平的影响及意义

研究背景

材料与方法

结果

一、手术情况

二、术后解剖

三、术后指标对比

四、术后上消化道造影

五、组织病理切片观察

六、胰腺免疫组织化学（Tunel法观察凋亡细胞）

讨论

主要参考文献

全文总结

综述一 外科手术治疗2型糖尿病的研究进展

综述二 Obestatin与2型糖尿病相关研究进展

致谢

在读期间发表论文及学术报告、参与编写论著