血清和胆汁中MMP7的表达水平对胆管癌诊断价值

摘要

目的：
　　 一、检测患者血清中MMP-7表达水平，探讨其对胆管癌的临床诊断与鉴别诊断中的价值。
　　 二、检测患者胆汁中MMP-7表达水平，探讨其对胆管癌的临床诊断与鉴别诊断中的价值。
　　 材料和方法：
　　 一、材料
　　 收集2011年12月至2012年6月在东方肝胆外科医院内镜科行ERCP诊疗的梗阻性黄疸患者(n=49)的血清和胆汁。胆管癌的诊断依据组织活检、细胞刷检、影像学诊断和临床随访。共收集到29位胆管癌患者和20位良性狭窄患者。
　　 二、 MMP-7及临床参数的检测
　　 （一）抽取患者空腹静脉血3ml，室温下静置3-4h，3000r/min离心10min，留取上清后于-80℃冰箱保存待测。
　　 （二）在注射造影剂之前收集胆汁且所有胆汁都源于梗阻或狭窄段以上，3000r/min离心10min，留取上清后于-80℃冰箱保存待测。
　　 （三）采用酶联免疫吸附实验法(ELISA)检测血清和胆汁中MMP-7表达水平。取出试剂盒，于室温(20-25℃)放置30分钟。取出酶标板，按照标准品的次序分别加入100μ L的标准品溶液于空白微孔中。空白微孔中加入100μ L的样品，空白对照加入100μ L的蒸馏水。在各孔中加入50μ L的酶标记溶液（不含空白对照孔）。将酶标板用封口胶封闭后，37℃孵育反应1小时。充分清洗酶标板5次，保持各孔有充足的水压。酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干。各孔加入显色剂A50μL，各孔加入显色剂B50μL。20-25℃下避光反应10分钟。各孔加入50μ L终止液，终止反应。
　　 （四）血清中其他生化检查包括总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、CA19-9、CEA在东方肝胆外科医院检验科用常规方法检测。
　　 三、统计分析
　　 采用SSPS20.0进行分析，计量资料两独立样本间的比较采用Mann-WhitneyU检验，计数资料样本间比较采用Pearson Chi-square检验。相关分析采用Spearman相关检验，绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线），检验水准α=0.05。
　　 结果：
　　 一、血清MMP-7表达胆管癌组(M5.47ng/ml，IQR4.26-6.81;x±SD5.42±0.30 ng/ml)高于良性组(M4.22ng/ml，IQR3.82-4.82;x±SD4.28±0.19ng/ml)，差别有统计学意义(P=0.009)。以为4.88 ng/ml(AUC0.722，95％CI0.580-0.865)为界值血清MMP-7诊断胆管癌的敏感性为65.5％、特异性为80.0％。
　　 二、胆汁MMP7表达胆管癌组(M9.01ng/ml，IQR8.24-10.78;x±SD10.05±0.69 ng/ml)高于良性组(M7.64ng/ml，IQR7.02-8.70;x±SD8.26±0.443ng/ml)，差别有统计学意义(P=0.012);以8.32 ng/ml(AUC0.713，95％CI0.564-0.862)为界值胆汁MMP-7诊断胆管癌的敏感性为75.9％、特异性为65.0％。
　　 三、血清、胆汁MMP-7表达水平与临床参数无明显相关性。
　　 结论：
　　 血清、胆汁MMP-7可以作为诊断胆管癌的标记物，且对鉴别胆管癌和胆道良性病变有一定的意义。

目录

声明

摘要

中英文缩略词表

前言

一、材料与方法

(一)材料

(二)实验方法

二、结果

(一)、病人一般情况

(二)、血清MMP-7和胆汁MMP-7的检测

(三)、ROC曲线分析

三、讨论

四、结论

参考文献

综述

攻读学位期间发表的论文

致谢