异甘草酸镁预防癌性贫血的实验研究

摘要

目的:癌性贫血(CRA)是恶性肿瘤发生发展过程中一种常见的并发症，不但可以显著影响患者的生存质量，而且因为贫血可以导致肿瘤组织乏氧，使患者对多种治疗耐受，从而影响治疗效果，降低患者生存期，成为影响肿瘤患者预后的独立因子之一。近年来，许多学者研究证实多种炎症因子在贫血的发生发展过程中起到十分重要的作用，尤其是IL-6，然而，其具体机理尚未得到明确证实。因此该实验主要证实IL-6和CRA的关系，为指导后期临床用药建立CRA动物模型。同时异甘草酸镁是临床常用的抗炎药，同时有研究证实异甘草酸镁可以通过多种途径抑制多种炎症因子的释放，该实验验证这种抑制炎症因子释放的作用是否可以预防CRA的发生。 方法:免疫组化的方法检测肿瘤患者组织芯片IL-6的表达情况;ELISA的方法检测80例肿瘤患者血清IL-6的水平，统计学方法分析血清IL-6水平和患者血红蛋白水平之间的关系;通过可以分泌IL-6的结肠癌细胞株COLON26建立并鉴定癌性贫血动物模型:从小鼠荷瘤后第七天起，每四天处死五只小鼠;通过ELISA的方法检测小鼠血清IL-6水平;长征医院检验科检测小鼠血常规;通过RT-PCR的方法检测肝脏hepcidin mRNA的表达情况;通过western blot和免疫组化的方法从蛋白水平检测小鼠肿瘤组织STAT3，P-STAT3，AKT和P-AKT的表达情况。统计学方法验证血清IL-6的水平和血红蛋白的关系。验证异甘草酸镁是否可预防及改善贫血的发生:小鼠荷瘤后随机分为四组，实验组一（5-FU+异甘草酸镁），实验组二（生理盐水+异甘草酸镁），对照组一(5-FU)，对照组二（生理盐水）。异甘草酸镁于小鼠荷瘤后第七天腹腔注射给药，每七天每组处死5只小鼠，于长征医院检验科检测血常规，观察贫血发生情况及瘤重变化情况。 结果:在胃肠肿瘤患者组织芯片中肿瘤组织IL-6的表达水平高于正常组织(P＜0.05)。贫血的肿瘤患者血清IL-6水平明显高于非贫血的肿瘤患者(P＜0.05)。在CRA动物模型中，血红蛋白水平于第23天开始下降，出现贫血，而血清IL-6水平从第19天起开始升高，第23天急剧升高。免疫组化结果显示贫血小鼠的肿瘤组织 P-STAT3，P-AKT的表达水平明显高于非贫血的小鼠，且贫血小鼠的肝脏hepcidin的表达水平高于非贫血小鼠。且到了肿瘤后期，小鼠RDW水平开始升高，而HCT，MCH和MCHC水平则出现下降。白细胞和血小板的水平在疾病发展的过程中也出现了很大程度的升高。实验二中，异甘草酸镁对单纯肿瘤导致的贫血及化疗药物导致的贫血均有一定的预防作用。在肿瘤晚期虽仍有少数小鼠出现轻度贫血，但贫血程度有所减轻，血红蛋白的平均值给药组小鼠高于对照组小鼠(P＜0.05)。 结论:实验证实IL-6在胃肠道肿瘤组织中的表达明显高于正常组织，在我们的动物模型中IL-6在贫血的发生发展过程中起到重要的作用，为进一步研究CRA的机理探索新的治疗方法指明一个新的方向。在我们建立的动物模型中，早期应用异甘草酸镁对单纯肿瘤导致的贫血及化疗药物导致的贫血均有一定的预防作用，且有一定的抑制肿瘤生长的作用，我们可以得出结论，在某些癌性患者确诊初期，提前使用抗炎药或许可以预防CRA的发生。但在肿瘤后期，仍有少数小鼠出现贫血，可能的原因为CRA的发生通常为多种因素共同作用的结果，到后期CRA的肿瘤患者，单纯的使用抗炎药并不能很好的控制贫血的发生，尚需联合使用其他药物才能更好地提高患者的生存质量。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一部分 IL-6在肿瘤组织中的表达情况及血清IL-6水平与癌性贫血的关系研究癌性贫血动物模型的建立及鉴定

一、IL-6在肿瘤组织中的表达情况和血清IL-6水平与癌性贫血的关系

一、实验材料

二、实验结果

癌性贫血动物模型的建立及鉴定

一、材料与方法

二、结果

三、讨论

第二部分 异甘草酸镁对癌性贫血的预防研究

一、材料与方法

(一)实验材料

(二)实验方法

(三)统计学方法

二、结果

三、讨论

全文总结

参考文献

综述 炎性因子与癌性贫血的关系

硕士在读期间发表论文和参加科研工作情况

致谢