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急性白血病患者体内IL-32表达及其临床意义

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符号说明

前言

材料与方法

一、技术路线:

二、材料:

三、统计学处理

结果

1、ELISA方法检测急性白血病患者外周血清中IL-32蛋白的表达

2、PCR检测急性白血病患者外周血中IL-32mRNA相对表达

讨论

结论

附图

参考文献

综述: 白介素32与疾病的关系研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

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摘要

目的:
  急性白血病(AL)是造血干细胞克隆性疾病,具有高度异质性。白介素32(IL-32)是新发现的促炎细胞因子,本课题检测AL外周血中IL-32的水平变化,探讨与AL之间的关系。
  方法:
  1、研究对象
  1.1 ELISA检测对象
  2014年3月至2014年12月在山东省泰安市泰安中心医院血液科住院部收集急性白血病患者66例。全部患者均经过免疫学和骨髓细胞学的确诊,符合FAB的分型标准。其中男性36例,女性30例,年龄大于60岁的患者17例,小于60岁的患者49例。疾病初诊期患者18例,部分缓解期患者19例,完全缓解期患者20例,复发期患者9例。急性非淋巴细胞白血病患者51例,急性淋巴细胞白血病患者15例。急性非淋巴细胞白血病患者中,M2型6例,M3型15例,M4型9例,M5型14例,M6型7例。急性淋巴细胞白血病患者中,T型3例,B型12例。健康对照人群30例。
  1.2 PCR检测对象
  2014年3月至2014年12月在山东省泰安市泰安中心医院血液科住院部收集急性白血病患者42例。全部患者均经过免疫学和骨髓细胞学的确诊,符合FAB的分型标准。其中男性24例,女性18例。年龄大于60患者9例,小于60岁患者33例。疾病初诊期患者15例,部分缓解期患者9例,完全缓解期患者13例,复发期患者5例。急性非淋巴细胞白血病患者32例,急性淋巴细胞白血病患者10例。急性非淋巴细胞白血病患者中,M2型3例,M3型11例,M4型4例,M5型10例,M6型4例。急性淋巴细胞白血病患者中,T型1例,B型9例。健康对照人群20例。
  2、实验方法
  2.1采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测66例急性白血病患者外周血清中IL-32蛋白浓度,并与30名健康人群做对照。
  2.2采用实时荧光定量PCR技术检测42例急性白血病患者外周血中IL-32mRNA的表达水平,并与20名健康人群做对照。
  3、统计方法
  用均数±标准差(X±S)表示检测结果,采用SPSS13.0统计分析软件进行数据处理。两样本间比较采用t检验,组间比较采用单因素方差分析,以p<0.05作为差异有统计学意义。
  结果:
  1、ELISA实验
  1.1急性白血病患者组血清中IL-32蛋白含量为(25.74±1.21)ng/L,正常对照组血清中IL-32蛋白含量为(18.77±0.71)ng/L。急性白血病患者组血清中IL-32蛋白水平明显高于正常对照组。差异有显著性(p<0.05)。
  1.2急性淋巴细胞白血病组、急性非淋巴细胞白血病组IL-32蛋白含量分别为(28.58±3.15)ng、(24.91±1.27)ng/L。与正常对照组相比IL-32蛋白水平明显升高,差异有显著性(p<0.05)。急性淋巴细胞白血病组与急性非淋巴细胞白血病组相比,有统计学意义(p>0.05)。
  1.3初诊期、部分缓解期、完全缓解期、复发期IL-32蛋白水平分别为(28.04±2.84) ng/L,(25.14±1.98)ng/L,(20.03±0.84)ng/L,(35.13±3.08)ng/L。初发组、复发组、部分缓解组与正常对照组相比IL-32水平明显升高,差异有显著性(p<0.05);完全缓解组与正常对照组相比IL-32水平升高,但无显著性差异(p>0.05)。完全缓解组与初发组、复发组、部分缓解组相比,有统计学意义(p<0.05)。
  1.4急性非淋细胞白血病患者组中,M2、M3、M4、M5、M6型患者血清IL-32蛋白含量分别为(19.12±1.61)ng/L,(26.14±1.93)ng/L,(25.94±1.83)ng/L,(26.23±3.80) ng/L,(23.27±1.45)ng/L。正常对照组中IL-32蛋白含量为(18.77±0.71)ng/L。M3型、M4型、M5型同正常对照组相比IL-32蛋白水平明显升高,差异有显著性(p<0.05)。M2型和M6型与正常对照组无差异性(p>0.05)。
  1.5急性淋细胞白血病患者组中,B型与T型组患者血清中IL-32蛋白含量分别为(30.84±3.66)ng/L,(19.52±0.72)ng/L。B型患者组与正常对照组相比IL-32蛋白水平明显升高,差异有显著性(p<0.05)。T型患者与正常对照组无差异性(p>0.05)。
  1.6急性白血病患者外周血中,IL-32蛋白含量的表达与年龄和性别无关,差异无统计学意义(p>0.05)。
  2、PCR实验
  2.1急性白血病患者外周血中IL-32mRNA相对表达为(2.43±0.27)与正常对照组(1.00±0.09)相比明显升高,差异具有统计学意义(p<0.05)。
  2.2急性淋巴细胞白血病患者组与急性非淋巴细胞白血病患者组IL-32mRNA的相对表达水平分别为(1.87±0.37)和(2.60±0.33)。正常对照组 IL-32mRNA的表达水平为(1.00±0.09),差异具有显著性(p<0.05)。急性淋巴细胞白血病组与急性非淋巴细胞白血病组相比,无统计学意义(p>0.05)。
  2.3初诊期、部分缓解期、完全缓解期、复发期患者组IL-32 mRNA表达水平分别为(3.60±0.52),(1.82±0.43),(1.23±0.16),(3.02±0.54)。正常对照组IL-32mRNA表达水平(1.00±0.09)。初诊组、部分缓解组、复发组的患者 IL-32mRNA表达水平较正常对照组明显升高,差异有显著性(p<0.05)。完全缓解组患者 IL-32mRNA表达水平较正常对照组相对升高,但差异无显著性(p>0.05)。完全缓解组和初诊期、部分缓解期、完全缓解期比较,有统计学意义(p<0.05)。
  2.4急性非淋细胞白血病患者组中,M2、M3、M4、M5、M6型患者IL-32mRNA表达水平分别为(1.28±0.27),(2.52±0.54),(3.13±1.00),(3.31±0.72),(1.57±0.38)。正常对照组IL-32mRNA表达水平为(1.00±0.09)。M3、M4、M5型IL-32mRNA相对表达水平显著高于正常对照组,差异有显著性(p<0.05)。M2和M6型IL-32mRNA相对表达水平较正常对照组高,但差异无显著性(p>0.05)。
  2.5急性淋巴细胞白血病 B型患者 IL-32mRNA相对表达水平(1.88±0.41),正常对照组IL-32mRNA表达水平为(1.00±0.09)。急性淋巴细胞B型患者较正常对照组IL-32mRNA表达水平升高,差异有显著性(p<0.05)。
  2.6急性白血病患者外周血中,IL-32mRNA的表达与年龄和性别无关,差异无统计学意义(p>0.05)。
  结论:
  急性白血病患者外周血中IL-32蛋白和mRNA的水平与其自身的病情发展有密切联系,检测患者外周血中IL-32蛋白和mRNA的动态变化,有助于了解急性白血病的进展情况。

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