AA和DHA在大鼠前体脂肪细胞增殖与分化中的调控作用

摘要

本文以生长发育正常、健康状况良好的20日龄雄性SD大鼠为实验动物，采用脂肪细胞离体培养技术分离培养大鼠前体脂肪细胞，以不同浓度的花生四烯酸(AA)和二十二碳六烯酸(DHA)处理细胞，分析了AA和DHA对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响，并比较了不同浓度AA和DHA对前体脂肪细胞分化过程中过氧化物酶增殖物活化受体-γ2(PPAR-γ2)及环氧合酶-2(COX-2)基因mRNA表达的调控，为进一步阐明AA和DHA两种多不饱和脂肪酸(PUFA)在脂肪细胞增殖与分化中的作用机理提供理论依据。利用台盼兰排斥试验、噻唑蓝比色法(MTT)、Hoechst33342荧光染色、流式细胞术测细胞周期法等实验技术分别检测了不同浓度AA和DHA对大鼠前体脂肪细胞活力、细胞周期及凋亡的影响。　　通过细胞形态观察、油红O染色、香草醛测总脂法和考马斯亮蓝测总蛋白等方法分析不同浓度AA和DHA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响。　　采用半定量RT-PCR技术分析40μmol/L、160μmol/L两种浓度的AA和DHA对大鼠脂肪细胞中PPARγ2和COX-2mRNA表达的影响。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及导师承诺及关于论文使用授权的说明

第一部分文献综述

1前体脂肪细胞增殖与分化

1.1前体脂肪细胞定型阶段

1.2前体脂肪细胞终末分化阶段

1.3前体脂肪细胞分化的标志

2脂肪细胞分化研究进展

2.1促进脂肪细胞分化的因素

2.2抑制脂肪细胞分化的因素

2.3其它与脂肪细胞分化有关的因素

3 PUFA研究进展

3.1 PUFA的分类及来源

3.2 PUFA对脂肪酸合成酶和体脂沉积的影响

3.3 PUFA对生脂酶基因表达的影响

3.4 PUFA调控基因表达的机制

第二部分实验研究

前言

试验一AA对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响

1实验材料与方法

2结果与分析

3讨论

试验二DHA对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响

1实验材料与方法

2结果与分析

3讨论

试验三AA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响

1实验材料与方法

2结果与分析

3讨论

试验四DHA对大鼠前体脂肪细胞分化的影响

1实验材料与方法同上

2结果与分析

3讨论

试验五AA、DHA对PPAR-γ2和COX-2 mRNA表达的影响

1实验材料与方法

2结果与分析

3讨论

结论

致 谢

参考文献

作者简介