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耐盐树种沙枣、梭梭和四翅滨藜的组培快繁及耐盐株系筛选

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研究生学位论文的独创性声明及导师指导研究生学位论文的承诺及关于其他单位与人员对研究生学位论文使用授权的说明

第一章文献综述

第二章沙枣的离体培养再生植株研究

第三章四翅滨藜的快繁体系的建立

第四章梭梭的快繁体系的建立

第五章梭梭、沙枣及四翅滨藜耐盐株系的筛选

第六章讨论与建议

参考文献

缩略词表

致 谢

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摘要

本研究在离体培养条件下对我国盐生树种沙枣、梭梭及原产美国的盐生树种四翅滨藜进行了系统研究。采取控制试验的方法,通过正交试验及单因素对比试验,对沙枣、梭梭及四翅滨藜外植体、培养基、激素类别等进行了不同组合、不同浓度的筛选,解决了三个物种的离体快繁的关键技术;通过在生根培养基中分别加入NaCl,建立NaCl盐胁迫梯度,在胁迫条件下,观察统计三个树种试管苗的生长状况,筛选出耐盐树种及株系。为盐生园林绿化植物资源的引种、盐生树种的无性繁殖、耐盐无性系的选育,以及遗传改良奠定基础。 主要研究结果如下: 1.沙枣快繁方案沙枣快繁体系的最适培养方案为:①诱导愈伤组织的最佳外植体:苗期10d的沙枣无菌苗子叶;②愈伤组织诱导培养基:MS+NAA0.5mg·L-1+BA2.0mg·L-1+3%蔗糖;③芽的分化培养基:MS+NAA0.1mg·L-1+BA1.0mg·L-1+3%蔗糖;④壮苗培养基:MS+NAA0.1mg·L-1+BA1.0mg·L-1+GA30.2mg·L-1+3%蔗糖;⑤生根培养基:1/2MS+ABT生根粉(1号)1.0mg·L-1+1.5%蔗糖。 2.四翅滨藜快繁方案以当年生长势旺盛的半木质化萌发枝茎段为材料,四翅滨藜快繁体系的最适培养方案为:①启动培养的基本培养基:MS或改良H+BA0.5mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+3%蔗糖;②增殖培养基:MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+蔗糖3%;③玻璃化的防治:MS+活性炭2.0g+3%蔗糖;④生根培养基:1/2MS+ABT1.0mg·L-1+1.5%蔗糖。 3.梭梭快繁方案以无菌条件下培养的梭梭幼苗茎尖为材料,梭梭快繁体系的最适培养方案为:①启动培养的基本培养基:MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+3%蔗糖;②增殖培养基:MS+BA2.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+蔗糖3%;③壮苗培养基:MS+BA1.5mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+生物素(biotin)2.0g+蔗糖3%。 4.盐胁迫与试管苗生长以NaCl为胁迫因子,对梭梭、沙枣及四翅滨藜试管苗进行了盐胁迫试验,研究认为:①在盐胁迫的50天时间内,三个树种试管苗的侧芽萌发倍数、增殖系数与盐浓度(在105~280mmol/LNaCl范围内)呈显著负相关;沙枣和四翅滨藜的生根率、平均生根数与盐浓度呈极显著负相关;试管苗的受害指数、胁迫敏感指数与盐浓度(0~280mmol/LNaCI范围内)呈正相关;试管苗的组织含水量与盐浓度(0~280mmol/LNaCI范围内)呈负相关;在140mmol/LNaCl胁迫下,随着盐胁迫时间的延长,受害率和受害指数呈上升趋势;受害率、受害指数与盐胁迫时间呈极正相关,受害率和受害指数增加最快的是在胁迫后8~15天,之后增加较为缓慢。②较高盐分浓度下(175~280mmol/LNaCl),三个树种在胁迫3~7d后即出现盐害症状,表现为叶片褐变,失水萎蔫,而且盐浓度越大,症状越明显,盐害出现时间越早,盐害指数越高。③耐盐株系选择:以盐胁迫50天时试管苗的侧芽萌发倍数、增殖系数、生根率、生根数目、受害指数、组织含水量、胁迫敏感指数等作为主要指标,以盐害出现时间、生根和萌芽达30%时的时间及盐害达30%时的时间作为参考指标,认为三个供试树种中四翅滨藜试管苗的耐盐能力最强,其次为沙枣及梭梭。

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