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西藏地区青稞籽粒镰孢属真菌及其致病性研究

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第一章文献综述

第二章材料与方法

第三章结果与分析

第四章结论与讨论

参考文献

附录

致谢

作者简介

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摘要

目前西藏地区由真菌引起的青稞病害是造成其产量低,品质欠佳的主要因素之一。镰孢菌属真菌是各类作物中最常见的一类致病菌之一,不仅造成减产,影响其品质,更为严重的是镰孢菌产生的毒素可引起癌症、大骨节病、克山病等人类疾病,严重影响当地人民的身体健康和生活质量。因而,本研究小组从2004年至今,从西藏5个不同地区的大量青稞籽粒内按常规方法分离镰孢属真菌,并进行了形态学和分子生物学鉴定;采用土壤接种和青稞叶片接种的方式对所得分离菌株的致病性测定;以分离菌株中优势种和强致病性的F.avenaceumHb39分离菌株为对象,研究了温度、湿度、pH、光照、营养对其菌丝生长和孢子萌发的影响。上述研究为进一步研究由镰孢属真菌引起的青稞病害发生规律、防治方法奠定了基础,并为由此引致的人类疾病的研究提供理论依据。研究取得了以下结果: 1.从西藏的拉萨等5个地(市)采集的样品中的5000个青稞籽粒分离得到产孢的61株镰孢属真菌分离菌株,青稞籽粒的镰孢属真菌带菌率为1.22%。其中林芝地区的带菌率最高,为1.70%;昌都、拉萨、山南三地(市)带菌率一般,三地之间差距不明显;日喀则的带菌率最低,500个籽粒只分离出1株镰孢菌。 2.经形态学和分子生物学鉴定,61株菌分属于燕麦镰孢(Fusariumavenaceum)等的镰孢属9个种,其中燕麦镰孢(F.avenaceum)有37株,占总分离菌株的60.66%,在西藏地区的青稞籽粒镰孢属真菌内为优势种;其次是三线镰孢(F.tricinctum)、串珠镰孢胶孢变种(F.moniliformevar.subglutinans),分别占总分离菌株22.95%和6.56%。其余的6个种分别为雪腐镰孢(F.nivale)、柔毛镰孢(F.flocciferum)、茄类镰孢(F.solani)、束梗孢镰孢(F.stilboides)、拟直孢镰孢(F.arthrosporioides)、未知镰孢(Fusariumspp.),这6个种均只分离得到了一株菌。 3.对分离菌株致病性测定结果显示,测试的分离菌株对青稞种子的萌发均有不同程度的影响,种子萌发率最低的是接种分离菌株Hb16的处理,萌发率仅为29.41%。通过进一步观察发现,测试分离菌株对青稞幼苗的生长也有不同程度的影响,主要表现在出苗后长势较弱,茎基部生长畸形,导致在出苗后一周内就开始倒伏,但对土壤内的根部影响不大。测试的61个分离菌株中,57个分离菌株对离体青稞叶片具有不同程度的致病性,占测试分离菌株的93.44%。 4.通过对F.avenaceumHb39分离菌株生物学特性测定其结果显示,在供试的10种不同固体、液体培养基上均能生长,但菌丝生长速度和生长量均有很大差异,PDBA、PDA、PSA培养基有利于该菌的生长,而HA、CMA和WA不利于该菌的生长。比较不同碳、氮源对菌丝生长的影响,发现该菌能利用多种单糖、多糖及可溶性淀粉作碳源,其中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖较好;能利用蛋白胨等有机氮和硝酸钠等无机氮作氮源,其中蛋白胨最好。该菌最适生长温度为25℃,生长的温度范围为5-30℃。菌丝生长最适pH为6,也能在pH3-12的范围内生长。连续光照不利于菌丝的生长,而光暗交替或黑暗条件下菌落生长无显著性差异。大型分生孢子萌发的温湿度和pH范围分别为10-30℃、RH85%-100%和pH3-12,最适萌发条件为25℃、RH100%和pH6。该菌株的致死温度为45℃10min。

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