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第一章综述
1.1微孢子虫的生物学特征
1.1.1微孢子虫的形态结构特征
1.1.2生活史
1.2微孢子虫诊断检测方法的研究
1.2.1透射电镜技术检测
1.2.2光学显微技术检测
1.2.3免疫学技术检测
1.2.4分子生物学技术检测
1.3家蚕微粒子病检测技术研究进展
1.3.1以肉眼鉴定为主的检测技术
1.3.2以镜检技术为主的技术进展
1.3.3以血清学检测技术为主的技术进展
1.3.4以分子生物学为基础的检测技术研究进展
1.4家蚕成品卵微粒子病检测技术研究进展
1.5蚕种生产中微粒子病的检测方法
1.5.1母蛾检疫
1.5.2成品卵检疫
1.5.3其他检疫方法
1.6本试验的目的意义
第二章家蚕微孢子虫的繁殖纯化和抗体的制备
2.1材料
2.1.1实验材料
2.1.2主要仪器与设备
2.1.3主要试剂及配制
2.2方法
2.2.1微孢子的繁殖
2.2.2微孢子的提取和纯化
2.2.3杂交流瘤细胞的复苏克隆与腹水的制备
2.2.4多抗血清的制备
2.2.5抗体纯化
2.2.5抗体效价测定
2.3结果与分析
2.3.1家蚕微孢子虫的繁殖和纯化
2.3.2单克隆抗体的复苏克隆和腹水制备
2.3.3多克隆抗体的制备
2.3.4抗体效价的测定
2.3.4液氮处理孢子和未处理孢子包被效果的对比
2.4讨论
2.4.1单抗ELISA技术应用于微孢子虫检测的可行性
2.4.2包被用微孢子虫的处理方式
第三章家蚕微孢子虫表面蛋白的提取、Western blot和单抗的酶标记
3.1材料
3.1.1主要仪器与设备
3.1.2主要试剂及配制
3.2方法
3.2.1家蚕微孢子虫表面蛋白的提取
3.2.2 SDS-PAGA
3.2.3 Western blot
3.2.4单克隆抗体的酶标记
3.3结果与分析
3.3.1家蚕微孢子虫表面蛋白SDS-PAGE
3.3.3 Western Blot
3.3.3单克隆抗体酶标记效果
3.3.4标记抗体效价测定
3.4讨论
第四章ELISA检测方法的建立
4.1材料
4.1.1实验材料
4.1.2主要仪器设备与试剂配制
4.2方法
4.2.1纯化孢子ELISA检测方法的建立
4.2.2纯化孢子检测灵敏度研究
4.2.3人工添加Nb孢子蚕卵的检测灵敏度研究
4.3结果与分析
4.3.1纯化孢子ELISA检测方法的建立
4.3.2检测灵敏度研究
4.4讨论
结论
参考文献
致谢
作者简介