花椒种质资源调查收集及组织培养再生体系建立

摘要

花椒属于芸香科花椒属植物，落叶灌木或小乔木，是我国重要的调料和药用树种，在我国有着悠久的栽培历史。改革开放以来，随着人们生活水平的不断提高，花椒用作调料品方面的需求越来越大，再加上花椒新的利用途径的开发，如花椒芽菜、花椒香水、花椒精油、利用花椒生产杀虫剂、提取生物材油等，使得价格不断上涨，2006年优质花椒的市场价格达到了56元/kg。近年来，花椒的栽培规模不断扩大，产量大幅度提高，其带来的经济效益让许多农民富裕起来，在有的地方，花椒产业甚至已经成为地方经济的支柱产业。花椒育种长期处于相对落后的水平，已经远远不能满足当前发展的要求。本文对现有的花椒种质资源进行了调查和收集，为今后育种工作的开展准备好材料；研究花椒组织培养再生体系，以改进花椒育种落后、单一的手段；研究微型扦插技术，为良种的繁育和推广做好技术准备。主要研究结果如下： 1.种质资源的收集经过两年的调查和收集工作，对我国北方花椒的分布，各地栽培规模以及主要栽培品种、早期栽培品种和常见野生野生变异类型的情况有了详细的了解；对各主产区的主要栽培品种，早期栽培品种以及常见野生变异类型的生物学特性、经济价值和育种价值等方面做了细致研究，为今后花椒研究积累了有价值的材料。比较系统、全面的收集了我国北方花椒主要栽培区的花椒种质资源44个，包括主要栽培种质资源26个，早期栽培品种7个、常见野生变异类型11个、优树1株。采用完全随机区组5次重复试验设计，在西北农林科技大学林学院苗圃为建立花椒种质资源库进行了育苗，所搜集的种质资源都获得了一定数量的苗子。为进行花椒种质资源的分类、评价和新品种的培育提供了条件，同时对花椒资源遗传多样性的保护，花椒种质资源的保存、利用以及开发也具有重要的价值。 2.组织培养再生体系的建立以凤椒的嫩茎、嫩叶和韧皮部为外植体，研究了不同种类和不同浓度浓度的细胞分裂素(TDZ、ZT和6—BA)和生长素(IBA和NAA)组合对花椒组织培养再生体系各个环节的影响，建立了完整的花椒组织培养再生体系。试验结果表明：嫩叶是诱导花椒愈伤组织较好的材料；MS+0.5mg/L2，4-D+O.5 mg/L BA能成功诱导嫩叶产生愈伤组织，诱导率达90％，且愈伤组织生长良好;MS+O.03 mg/LTDZ+0.1 mg/LBA能成功的诱导愈伤组织分化出正常的不定芽，诱导率达70％，不同光照强度、不同材料诱导的愈伤组织以及不同继代次数的愈伤组织分化能力有明显差异；最适的芽增殖培养基为MS+0.4 mg/L6-BA+O.3mg/LIBA，增殖系数为6.2；1/4MS+0.4 mg/L IBA能成功诱导健壮的无根苗生根，生根率达90％以上。花椒试管苗瓶外扦插试验结果表明，珍珠岩：河沙=1:1是试管苗瓶外扦插的理想基质；100～500ppmIBA浓度变化对扦插效果影响不明显，以300ppm略优：基质消毒和扦插保湿对花椒微型扦插有着重要的影响。愈伤组织再生体系的建立，为今后花椒育种中现代生物技术的应用铺平了道路，具有重要的意义。 3.扦插技术研究研究了不同基质、不同浓度IBA溶液及其不同处理时间对花椒一年生枝条微型扦插的影响。结果表明：不同基质对花椒扦插生根率和生根数量都有显著影响，以珍珠岩：河沙=1:1做花椒扦插的基质最好，其效果优于含水量更高的蛭石基质；不同浓度IBA处理对生根有着显著影响，以lOOppm浓度处理效果最好，高于150ppm的IBA处理容易导致插穗产生愈伤组织；不同处理时间对生根率影响较大，以24小时处理为最佳时间，时间过长则因插条叶片失水导致生根率大大降低。在基质消毒充分前提下，采用珍珠岩：河沙=1:1做基质，插穗用100ppmIBA处理24小时，扦插后浇透水、用地膜覆盖，生根率可达100％，平均生根条数为6～8条。

目录

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第一章文献综述

1.1花椒的栽培和应用历史

1.2我国北方花椒生产概况

1.2.1陕西韩城花椒生产概况

1.2.2陕西凤县花椒生产概况

1.2.3甘肃秦安花椒生产概况

1.2.4甘肃武都花椒生产概况

1.2.5甘肃临夏花椒生产概况

1.2.6河北涉县花椒生产概况

1.2.7河北平山花椒生产概况

1.2.8青海循化花椒生产概况

1.3花椒研究概况

1.3.1国内研究

1.3.2国外研究

1.4林木再生体系研究进展

1.4.1影响木林木再生体系建立的主要因素

1.4.2植株再生中的基因表达与调控

1.5本研究目的和意义

第二章花椒种质资源调查、收集与保存

2.1研究对象

2.2方法

2.2.1调查方法

2.2.2收集方法

2.2.3种质资源圃的建立

2.3结果与分析

2.3.1各主产区主栽品种、早期栽培品种及常见野生变异类型性状

2.3.2种质资源收集结果

2.3.3种质资源的保存

2.4小结

第三章花椒组织培养再生体系研究

3.1材料与方法

3.1.1材料

3.1.2方法

3.2结果与分析

3.2.1不同灭菌时间对外植灭菌效果的影响

3.2.2不同材料诱导愈伤组织及最适激素种类和浓度的研究

3.2.3愈伤组织增殖及继代培养基研究

3.2.4愈伤组织分化芽的研究

3.2.5不定芽复壮及芽增殖培养基优化研究

3.2.6最适生根培养基研究

3.2.7花椒试管苗移栽不同炼苗方式的研究

3.2.9组培苗瓶外生根技术研究

3.3小结

第四章花椒微型扦插育苗技术研究

4.1材料与方法

4.1.1材料

4.1.2方法

4.2结果与分析

4.2.1扦插后不同时间根的发育情况

4.2.2不同处理方式生根情况比较

4.2.3不同移栽时间移栽效果比较

4.3小结

第五章结论与讨论

5.1主要结论

5.2讨论与建议

5.2.1讨论

5.2.2建议

参考文献

附录

致谢

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