纸坊沟流域沙棘与柠条根际AM真菌资源与微生物群落研究

摘要

本研究通过调查安塞纸坊沟流域沙棘(Hippophae rhamnoides)、柠条(Caraganakorshinskii)根际AM(Arbuscular Mycorrhiza)真菌资源、侵染情况，土壤因子对AM真菌在纸坊沟流域的分布，酶裂解法提取根际土壤微生物总DNA和应用PCR-DGGE技术对细菌及AM真菌群落分析等研究，得出以下结论： 1.安塞纸坊沟流域柠条和沙棘根际土中共分离鉴定出4属17种AM真菌：Glomusaggregatum、G albidum、G ambisporum、G caledonium、G claroideum、G constrictum、G deserticol、G etunicatum、G fasciulatum、G geosporum、G manihotis、G monosporum、G mosseae、G reticulatum、Acaulospora denticulata、Gigaspora gigantea、Scutellospora Heterogama。缩球囊霉和地球囊霉为该区域的优势菌种。 2.安塞纸坊沟流域不同沙棘和柠条采样地根际AM真菌种类不同。柠条为2～11种，沙棘为2～7种。根际土壤中孢子密度为242～640个/100g干土，柠条为283～640个/100g干土，沙棘为242-445个/100g干土，平均孢子密度为385个/100g干土。AM真菌侵染率柠条为42％～81％，沙棘为56％～76％，平均侵染率63％，AM真菌孢子密度与侵染率呈显著正相关，AM真菌种类与侵染率和孢子密度没有显著的相关性。 3.土壤因子对AM真菌影响的相关性分析表明，柠条根际AM真菌侵染率与有效磷和有效氮含量呈显著正相关;沙棘根际AM真菌侵染率与有效磷含量呈显著负相关，与有效氮含量呈负相关。通经分析发现在柠条根际有效磷和有机质通过直接作用影响侵染率，有效氮和pH值则通过间接作用影响侵染率，而在沙棘根际有效氮和有机质通过直接作用影响侵染率，有效磷和pH值通过间接作用影响侵染率。 4.应用酶裂解法成功提取安塞地区沙棘和柠条根际土壤中的微生物总DNA，结果表明总DNA提取效果受到土壤因子的影响。利用凝胶回收试剂盒可以有效的除去总DNA中的杂质。纯化样品DNA的颜色可以作为简单的判断标准。采用巢式PCR的方法成功对土壤细菌16S rDNA的V3片段和．AM真菌18S rDNA的V3～W4片段进行扩增，得到的片段约250bp，适于DGGE分析。 5.采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术成功研究了安塞纸坊沟流域沙棘和柠条根际细菌和AM真菌群落。结果表明植物对其根际细菌多样性有很大影响，沙棘根际细菌多样性大于柠条根际细菌多样性；AM真菌与宿主植物之间没有严格的专一性；相关性分析说明AM真菌对宿主植物根际细菌群落存在显著影响。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章文献综述

1.1 AM真菌系统分类

1.2 AM真菌的分类研究

1.2.1形态学水平

1.2.2生态学水平

1.2.3分子生物学水平

1.3 AM真菌多样性

1.3.1 AM真菌的物种多样性

1.3.2 AM真菌的生境多样性

1.3.3 AM真菌的宿主多样性

1.3.4AM真菌的生态分布多样性

1.4生态因子对AM真菌多样性的影响

1.4.1气候因子对AM真菌多样性的影响

1.4.2生物因子对AM真菌多样性的影响

1.4.3土壤因子对AM真菌多样性的影响

1.5 AM真菌在生态恢复中的作用

1.5.1 AM真菌在退化土壤恢复中的作用

1.5.2 AM真菌在退化植被重建中的作用

前言

第二章纸坊沟流域沙棘和柠条根际AM真菌资源调查

2.1研究地概况

2.2研究方法

2.2.1样品采集

2.2.2 AM真菌的分离和鉴定

2.2.3菌根结构特征观察

2.2.4土壤性质测定

2.2.5数据分析

2.3结果与分析

2.3.1沙棘和柠条根际AM真菌种类

2.3.2沙棘和柠条根际AM真菌的分布

2.3.3 AM真菌种类和孢子密度对侵染率的影响

2.3.4土壤因子对AM真菌侵染率的影响

2.4小结

第三章纸坊沟流域沙棘和柠条根际微生物群落研究

3.1研究地概况

3.2实验方法

3.2.1实验材料

3.2.2样品采集

3.2.3总DNA的提取和纯化

3.2.4 PCR扩增

3.2.5 DGGE分析

3.3结果与分析

3.3.1总DNA的提取和纯化

3.3.2 PCR扩增结果

3.3.3 DGGE的分析

3.4小结

第四章结论与讨论

4.1结论

4.2讨论

4.2.1柠条和沙棘根际AM真菌多样性

4.2.2柠条和沙棘根际AM真菌的分布

4.2.3土壤因子对AM真菌的影响

4.2.4总DNA的提取效果

4.2.5总DNA纯化

4.2.6 PCR扩增

4.2.7细菌和AM真菌的DGGE分析

4.3研究特色和创新点

4.4研究展望

参考文献

图 版

致 谢

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