拮抗毛壳菌61239的分类鉴定及其生防作用研究

摘要

苹果树腐烂病(apple valsa canker)是一种危害苹果树枝干的严重病害，由苹果黑腐皮壳菌(Valsa mali Miyabe et Yamada)侵染引起，危害果树造成皮层腐烂坏死。近年来研究发现一些毛壳菌(Chaetomium)种类具有产生生物活性物质和防治植物病害的能力，在一些国家和地区已被开发成商品制剂。本作者分离筛选出一株毛壳菌，并研究了与苹果腐烂病菌的互作，获得了如下结果:
　　1、从苹果主干的老皮上分离出一株毛壳菌株61239，经形态学和分子生物学鉴定，确定该菌株为球毛壳Chaetomium globsum。
　　2、将球毛壳菌61239与苹果腐烂病菌进行对峙培养，产生抑菌带，挑取抑菌带外围的腐烂病菌菌丝进行观察，发现其菌丝顶端膨大。采用PD培养基对球毛壳菌株61239进行液体发酵，发现其发酵滤液对苹果树腐烂病菌菌丝的生长表现出显著的抑制作用，虽然随着稀释倍数的增大，抑制率在减小，但是球毛壳菌株61239发酵滤液的50倍稀释液在5d后仍有70.90％抑制率。
　　3、球毛壳菌株61239的发酵滤液对苹果腐烂病菌的分生孢子萌发有显著的抑制作用。但随着发酵滤液稀释倍数的增大，抑制效果会下降。当发酵滤液稀释5倍时，腐烂病菌分生孢子未萌发率达90％以上，显微观察发现，腐烂病菌分生孢子与球毛壳菌株61239的发酵滤液共同培养过程中，会造成分生孢子缢缩、体积变小。表明球毛壳生防菌在代谢过程中会产生一定的生理活性物质，该类物质对苹果腐烂病菌具有一定的致死效果和抑制生长效果。
　　4、生防菌株61239对苹果腐烂病菌的离体接种试验表明:只接腐烂病菌的对照组病斑直径由5mm平均扩展至30.2mm。而在伤口处接种球毛壳生防菌的，尽管同时接种腐烂病菌，枝条上的伤口直径已小于5mm，而且伤口边缘出现愈伤组织，伤口表面出现球毛壳生防菌的黑色子囊果，防效达到100％。
　　5、生防菌株61239对苹果腐烂病的田间防治试验表明:在苹果采收后，在苹果树腐烂病疤处涂抹球毛壳生防菌61239孢子粉制成的糊剂后，次年早春腐烂病高发期，通过调查3个果园的老疤复发情况，发现老疤的未复发率均在75％以上。说明利用球毛壳孢子粉制成的糊剂可以有效防止腐烂老疤的复发。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1．1 苹果树腐烂病的研究现状

1．1．1 苹果树腐烂病的症状与危害

1．1．2 苹果腐烂病病原学研究

1．1．3 苹果树腐烂病侵染循环

1．1．4 苹果树腐烂病的综合防治

1．1．5 球毛壳菌形态特征

1．1．6 球毛壳菌的研究价值

1．1．7 球毛壳菌分子生物学研究进展

1．1．8 毛壳菌对植物病害的防治

1．1．9 毛壳菌在植物病害防治方面存在的问题和解决办法

1．2 本研究的内容和意义

第二章 材料与方法

2．1 试验材料

2．1．1 试验所用主要仪器、用具及用品

2．1．2 试验所用培养基

2．1．3 标本采集

2．1．4 试验所用试剂和主要溶液配制

2．2 试验方法

2．2．1 生防菌株的分离及生防拮抗菌的筛选

2．2．2 生防菌株61239对腐烂病菌分生孢子萌发和菌丝形态的影响

2．2．3 生防菌株61239对苹果腐烂病的离体防效和田间防治效果

2．2．4 生防菌株61239的形态学鉴定

2．2．5 rDNA-ITS序列分析及系统发育树构建

第三章 结果与分析

3．1 生防菌株的分离与纯化

3．2 生防菌株61239的形态和分子鉴定

3．2．1 形态鉴定

3．2．2 分子鉴定结果

3．3 生防菌株61239对腐烂病菌的拮抗作用

3．3．1 生防菌株61239对苹果树腐烂病菌的菌落大小以及菌丝形态的影响

3．3．2 生防菌株61239对苹果树腐烂病菌分生孢子萌发的影响

3．4 生防菌株61239对苹果腐烂病菌的离体接种效果

3．5．1 制作球毛壳生防菌61239可湿性粉剂

3．5．2 生防菌剂在苹果树体的定殖试验

3．5．3 球毛壳生防菌涂抹腐烂病疤的应用效果

第四章 结论与讨论

4．1 结论

4．2 讨论

参考文献

致谢

作者简介