秦岭细粘束孢P450基因克服寄主抗性的分子机制

摘要

秦岭细粘束孢（Leptographium qinlingensis）是主要危害我国秦岭巴山林区天然森林生态系统内健康华山松（Pinus armandi）木质部和韧皮部的重大病原菌，该菌协同小蠹虫入侵导致寄主树木的抗性能力下降，进而引发其他病虫害的集中危害，对森林生态环境造成严重破坏。细胞色素P450酶是真菌代谢中重要的酶系之一，在真菌降解寄主产生的化学防御物质过程中起重要作用。本研究通过对秦岭细粘束孢P450基因的分析，不同营养物质和萜类物质浓度下秦岭细粘束孢P450基因表达水平的研究，旨在揭示秦岭细粘束孢P450基因多样性和克服寄主化学防御物质协同小蠹虫入侵寄主的作用机制，取得研究结果如下： （1）通过转录组测序及注释获得32条秦岭细粘束孢P450基因，进行系统发育分析比对发现其中20条秦岭细粘束孢P450基因与Grosmannia clavigera和Ophiostoma piceae真菌P450基因的同源性高于51%。 （2）对不同营养物质培养基上秦岭细粘束孢5条P450基因的表达水平定量分析，得出5条P450基因在华山松韧皮部甲醇提取物和油酸培养基上均可被诱导表达；在无机氮培养基上秦岭细粘束孢的5条P450基因的表达明显被抑制，但菌落生长速率最快。 （3）萜类物质影响秦岭细粘束孢P450基因表达水平，单萜类混合物对5条P450基因的表达具有抑制作用；5条P450基因均可被（±）-α-pinene和（+）-limonene诱导表达；仅（+）-limonene的不同浓度对C12461表达影响具有显著差异，其余萜类物质的不同浓度对4条P450基因表达影响差异不显著。 这一研究结果不仅揭示出秦岭细粘束孢P450基因可被不同营养物质和萜类物质诱导表达，而且秦岭细粘束孢P450基因可通过调控细胞色素P450酶的表达水平，在克服寄主华山松树脂等抗性物质和协助华山松大小蠹入侵危害等方面发挥更为重要的作用。

目录

声明

第一章 文献综述

1.1 小蠹虫及其共生真菌对寄主的危害

1.2 寄主树木的化学防御

1.3 细胞色素P450酶

1.4 研究目的意义

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.2 不同营养物质对菌落生长速率的影响

2.3 秦岭细粘束孢基因克隆

2.4 秦岭细粘束孢P450基因系统发育分析

2.5 秦岭细粘束孢在不同碳源和不同萜类物质浓度下的表达分析

第三章 结果与分析

3.1 不同营养物质对菌落生长速率的影响

3.2 转录组测序

3.3 秦岭细粘束孢P450基因系统发育分析

3.4 秦岭细粘束孢P450基因对不同营养物质的响应

3.5 不同萜类物质处理对秦岭细粘束孢P450基因表达水平的影响

第四章 讨论与结论

4.1 讨论

4.2 结论

参考文献

缩略词

致谢

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