中药寒热药性的实验评价方法及物质基础研究

摘要

寒热温凉四性是中药的基本属性，长期临床经验表明：温热药作用于机体表现为生理功能的亢奋，寒凉药表现为生理功能的抑制。细胞是组成人体的基本单位，中药作用于细胞也应该有类似的寒热表现。基于这样一个基本假设，本文希望通过实验方法进行验证，并以此为基础建立评价中药寒热药性的实验方法。
　　 培养细胞功能的亢奋或抑制表现为其增殖的加快或减慢，利用MTT法就能方便的进行检测，而且肿瘤细胞培养容易，如能证实该体系能反映寒热药性，这将是一个比较理想的方法。选择6种典型的寒药(黄连、虎杖、竹叶、夏枯草、芒硝、青黛)、7种热药(干姜、肉桂、花椒、白胡椒、仙茅、吴茱萸、荜茇)观察它们对离体培养的人乳腺癌细胞MCF-7生长增殖的影响，以验证该方法评价中药寒热药性的可行性。实验结果表明，在一定浓度范围内，寒药抑制MCF-7的生长增殖，热药在低浓度时促进MCF-7的生长增殖，这与中医理论及临床经验是一致的，说明该方法能够从细胞水平评价中药寒、热药性，为中药药性研究开辟了新的思路和方法。
　　 中药治疗疾病的物质基础是其所含的化学成分，中药寒热药性的物质基础也应该是其所含的化学成分。为了揭示寒热药性的物质基础及其与化学成分之间的关系，本文选择显示温热性质的葱、蒜等中的主要化学成分硫醚类12种及糠硫醇、川芎中的化学成分甲基吡嗪类4种、醛及相对应的有机酸类12种、酚类2种采用MTT法检测其对离体培养的人乳腺癌细胞MCF-7生长增殖的影响，以分析所检测化合物的寒热属性，以及化学结构对寒热属性的影响，进而探索中药寒热药性的物质基础。结果表明：12种硫醚及糠硫醇、4种甲基吡嗪、4种有机酸及2种酚在一定浓度范围内促进MCF-7生长增殖，可能是含有这些成分中药显示温热性质的物质基础；8种醛对MCF-7生长增殖的影响结果不同，香草醛、邻位香草醛、辛醛在较低浓度范围内表现为促进作用，当浓度达到一定时转变为抑制作用，而葵醛、十一醛、水杨醛、胡椒醛、苯甲醛在所选浓度范围内均表现为抑制作用。这些结果说明此类化合物的寒热属性除与其主要官能团有关外，还与化合物其它部分的结构有关，应该整体考虑。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 绪 论

1.1、中药四性的研究概况

1.1.1中药四性的概念

1.1.2中药四性的现代科学内涵

1.1.3中药四性的物质基础研究

1.1.4中药四性评价方法的研究概况

1.2、研究背景及意义

1.2.1研究背景

1.2.2研究意义

1.3、研究思路及内容

1.3.1研究思路

1.3.2研究内容

第二章 评价中药寒热药性的实验方法研究

2.1引言

2.2、实验材料

2.2.1实验细胞株

2.2.2实验仪器

2.2.3药品与试剂

2.3、实验方法

2.3.1受试药品溶液的制备

2.3.2细胞培养

2.3.3 MTT实验

2.3.4统计学处理

2.4、结果

2.4.1肉桂、夏枯草对MCF-7体外生长增殖的影响结果对比

2.4.2黄连、虎杖、竹叶、青黛、芒硝五味寒药对MCF-7体外生长增殖的影响

2.4.3干姜、白胡椒、花椒、仙茅、吴茱萸、荜茇六味热药对MCF-7体外生长增殖的影响

2.4.4寒、热中药对MCF-7生长形态的影响

2.5、讨论

第三章 硫醚化合物的合成及表征

3.1、引言

3.1.1卤代烃和硫化钾或硫化钠反应

3.1.2硫酸酯和硫化钾或硫化钠反应

3.1.3硫醇或硫醇钠与卤代烷反应

3.1.4硫醇与烯烃加成

3.1.5对称二硫醚与烯烃反应

3.1.6烯丙基溴与对称二硫醚反应

3.1.7醚和五硫化二磷反应

3.1.8含有环氧乙烷环的化合物与硫氰化铵反应

3.2、实验仪器与试剂

3.2.1仪器

3.2.2试剂

3.3、硫醚类化合物的合成与表征

3.3.1二丁基一硫醚

3.3.2二丁基二硫醚

3.3.3二丁基三硫醚

3.3.4二烯丙基一硫醚

3.3.5二烯丙基二硫醚

3.3.6二烯丙基三硫醚

3.3.7二苄基一硫醚

3.3.8二苄基二硫醚

3.3.9二苄基三硫醚

3.4讨论

第四章 中药寒热药性物质基础探索

4.1、引言

4.2、实验材料

4.2.1实验细胞株

4.2.2实验仪器

4.2.3药品与试剂

4.3、实验方法

4.3.1受试药品溶液的制备

4.3.2细胞培养

4.3.3 MTT实验

4.3.4统计学处理

4.4、结果

4.4.1硫醚类化合物对MCF-7生长增殖的影响

4.4.2甲基吡嗪类化合物对MCF-7生长增殖的影响

4.4.3醛类、酚类、有机酸类化合物对MCF-7生长增殖的影响

4.5、讨论

结 论

参考文献

附 录

攻读硕士期间取得的科研成果

致 谢