基于棉线的可视化快速免疫层析分析技术的研究

摘要

本论文构建了一种以棉线为载体的免疫层析分析技术，利用不同的纳米材料，对肺癌标志物(鳞状癌细胞抗原、人铁蛋白)实现了快速、灵敏和可视化检测。具体工作如下:
　　(1)基于碳纳米管探针的棉线免疫层析分析技术
　　在本文中，成功地设计了一种基于碳纳米管(CNT)探针的棉线免疫分析技术，实现了可视化、快速检测肺癌标志物-人铁蛋白抗原。该种装置在30分钟内可以检测到50 ng/mL人铁蛋白抗原，与先前的基于碳纳米管探针的快速检测文献结果比较，灵敏度提高了大约500倍。
　　(2)设计了一种基于双纳米金信号探针的棉线免疫传感器，用于电化学测定肺癌标志物-鳞状细胞癌抗原(Squamous Cell Carcinoma Antigen，SCCA)。
　　通过使用两种金纳米粒子标记物来改善SCCA检测灵敏度，与传统的采用一种金纳米粒子为信号探针的棉线免疫层析分析技术比较，大大提高了分析的灵敏度。整个分析过程避免了在大多数传统的蛋白质分析中的繁琐重复的温育和洗涤步骤，缩短了分析时间和降低了成本。在最佳的实验条件下，线性范围为5-500ng/mL。
　　(3)基于金纳米棒探针的棉线免疫层析分析技术
　　本文设计了一种基于棉线免疫层析分析装置结合金纳米棒(GNRs)信号探针可视化、快速、灵敏的检测人铁蛋白抗原(Human ferritin)的方法。人铁蛋白是肺癌蛋白质生物标志物，对于肺癌早期检测具有重要的意义。结果表明，与传统的金纳米粒子探针相比，由于金纳米棒独特的光学性质，使得我们设计的棉线免疫层析分析装置的灵敏度提高了近1000倍。在最佳条件下，棉线免疫层析分析装置可以检测到5 ng/mL人铁蛋白抗原，满足临床诊断的要求。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 研究背景

1．1．1 肺癌生物标志物检测的意义

1．2 纳米材料

1．2．1 概念

1．2．2 纳米材料的发展历史

1．2．3 纳米材料的优点及其应用

1．2．4 对碳纳米管的认识

1．2．5 金纳米粒子

1．2．6 金纳米棒

1．3 基于棉线为载体的可视化快速免疫层析分析技术

1．3．1 棉线的优点

1．3．2 在分析领域中的应用

1．4 本文研究工作的思路

第二章 基于碳纳米管探针的棉线免疫层析分析技术的研究

2．1 引言

2．2 实验部分

2．2．1 试剂

2．2．2 仪器

2．2．3 碳纳米管探针的制备

2．2．4 ferritin的检测装置的构建及检测过程

2．3 结果与讨论

2．3．1 基于碳纳米管探针的棉线分析免疫层析技术检测人铁蛋白的原理

2．3．2 检测条件优化

2．3．3 其他蛋白质的影响

2．3．4 工作曲线

2．4 结论

第三章 基于棉线免疫层析分析装置的电化学检测鳞状细胞癌抗原(SCCA)

3．1 引言

3．2 实验部分

3．2．1 试剂

3．2．2 仪器

3．2．4 碳糊电极的制备

3．2．5 DNA-Au NP-dAb和Au NP-SA两种标记物的制备

3．2．6 结合垫1和2的准备

3．2．7 检测SCCA的干试剂棉线装置的搭建

3．3 结果与讨论

3．3．1 基于棉线免疫分析装置的SCCA信号增强干试剂电化学检测的原理

3．3．2 实验装置性能的研究

3．3．3 工作曲线

3．3．4 选择性研究

3．4 结论

第四章 基于金纳米棒探针的棉线免疫层析分析技术的研究

4．1 引言

4．2 实验部分

4．2．1 试剂

4．2．2 仪器

4．2．4 构建基于金纳米棒探针的棉线免疫装置检测人铁蛋白

4．3 结果与讨论

4．3．1 基于金纳米棒探针在棉线免疫层析分析装置上检测人铁蛋白

4．3．2 实验条件优化

4．3．3 其他蛋白质的影响

4．3．4 分析性能

4．4 结论

工作总结

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间取得的科研成果