紧密连接蛋白claudin-4在肾透明细胞癌中的表达及其预后意义

摘要

研究背景:由于发病机制不明和术后的高复发风险，我国肾癌的发病率及死亡率仍然维持在较高的水平，患者术后风险的评估在临床治疗过程中的重要性日益凸显。目前临床上常用的预后评估模型包括UISS肾癌预后多因素评分系统、SSIGN危险评分系统以及Leibovich等评分系统，在长期的临床实践中对ccRCC的治疗有着重要的临床指导意义。然而这些预后评估模型的参数如肿瘤的分期、TNM分级等与现行的AJCC2010版标准有较大的出入，尚需进一步改进。Claudin蛋白是细胞间连接重要的骨架蛋白，对正常细胞的生理活动起决定性的调控作用，一旦出现结构或功能的异常，就会引起包括恶性肿瘤在内的多种疾病的发生。claudin-4是其中一个亚型，有报道称在大多数癌变组织中含量明显增加且与部分肿瘤的预后相关，提示claudin-4的高表达可促进肿瘤的发生和发展，具有成为某些上皮细胞肿瘤的标记物及预后因子的潜在可能。目前关于claudin-4在肾透明细胞癌中的作用的研究较少，且不同学者之间存在争议。
　　目的:探讨claudin-4在ccRCC发生和发展过程中可能的作用及与术后复发的关系
　　方法:收集解放军307医院泌尿外科2012年9月～2014年1月手术切除的ccRCC组织50例和相应的正常组织10例，以免疫组织化学技术Envision二步法检测claudin-4在ccRCC组织和正常组织的表达水平的变化，与相应的临床分期、分级等进行统计学分析;随后随机选取其中4例ccRCC组织及4例肾新鲜组织以Western blot检测claudin-4的表达情况，并与免疫组化检测结果进行相关性分析;最后结合随访结果分析claudin-4的表达水平与患者无疾病生存期的关系。
　　结果:1、Claudin-4在正常肾脏和肾透明细胞癌组织中均有表达，主要定位于胞膜，胞浆中亦有不同程度的表达， IOD值分别为11391.384(8698.632，14292.705)、15616.762(10266.791，24221.539)，两组间具有显著差异性;2、在肾透明细胞癌组织中，claudin-4的表达与肿瘤的大小、浸润程度（T分期）、临床分期和淋巴受累与否相关。肿瘤直径＞7 cm、T3-T4、淋巴结转移的肾透明细胞癌患者claudin-4的表达水平显著升高;3、Western Blot结果显示claudin-4在正常肾组织中呈低表达，而在肾透明细胞癌组织中高表达，二者之间差别有统计学意义（t=-4.954，P=0.003），对Western blot与免疫组化两种检测方法检测的数据进行相关性分析显示:两种检测得出的数据呈正相关(r2=0.748，P=0.005);4、单因素生存分析显示，claudin-4高表达组患者的DFS为20.7个月，显著低于低表达组的30.8个月(P=0.002)。COX多因素比例风险模型分析显示claudin-4的表达不是肾透明细胞癌的独立预后因素(RR值=1.686，95％ CI0.174～16.311, P=0.652)。
　　结论:claudin-4蛋白可能促进肾透明细胞癌的发生和发展，有可能成为肾透明细胞癌潜在的治疗靶点及不良预后的指标。

目录

声明

缩略词表

摘要

前言

材料和方法

1．1 一般资料

1．2 主要仪器及试剂

1．3 免疫组化检测claudin-4表达

1．4 蛋白质印迹法检测claudin-4表达

1．5 实验数据统计分析

实验结果

1 正态性分布检验

2 免疫组化结果

2．1 免疫组化检测claudin-4在正常肾组织及ccRCC中的表达

2．2 Claudin-4的表达与ccRCC患者临床病理参数的相关性

3 蛋白印迹法结果

4 Claudin-4的表达与ccRCC患者术后无病生存期(DFS)的关系

讨论

结论

参考文献

综述

Claudin蛋白在恶性肿瘤中作用的研究进展

紧密连接蛋白claudin-4在肾透明细胞癌中的表达及预后意义

个人简历

致谢