瑞香狼毒石油醚提取物化学成分及抗癌活性研究

摘要

目的:研究瑞香狼毒石油醚提取物的分离纯化，测定分离物的体外抗癌效果，明确其抗癌的有效成分。
　　方法:采用常温浸渍法用95％乙醇对瑞香狼毒进行提取，然后用石油醚对乙醇粗提物进行萃取，硅胶柱层析对石油醚提取物进行分离纯化，质谱技术和核磁共振技术对分离物进行结构鉴定。不同浓度的分离物处理MRC-5细胞、NCI-H226细胞、95D细胞和BEL-7404细胞，MTT比色法测定分离物对4种细胞的抑制作用。
　　结果:1.从瑞香狼毒石油醚提取物中分离出一单体化合物-新狼毒素A;
　　2.新狼毒素A对MRC-5细胞、NCI-H226细胞、95D细胞和BEL-7404细胞均有抑制作用。不同浓度新狼毒素A24h对以上4种靶细胞的最大抑制率依次为55.77％、54.49％、34.50％和73.54％。不同浓度新狼毒素48h对以上4种靶细胞的最大抑制率依次为83.34％、54.49％、55.52％和87.14％。4种细胞24h的IC50分别为85.59μg/mL、94μg/mL和47.05μg/mL;4种细胞48h的IC50分别为56.55μg/mL、75.39μg/mL、88.87μg/mL和28.1μg/mL。
　　3.4种细胞中，新狼毒素A对BEL-7404细胞生长的抑制作用最强，MRC-5细胞次之，NCI-H226细胞和95D细胞受到的的抑制作用最弱;
　　4.新狼毒素A对癌细胞的毒杀作用表现出一定的选择性，对肝癌细胞的毒杀作用明显强于肺癌细胞;
　　结论:新狼毒素A有可能是石油醚提取物产生抗癌效果的有效成分之一。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 瑞香狼毒简介

1．1．1 瑞香狼毒的形态与分布

1．1．2 瑞香狼毒的生物学特性

1．1．3 瑞香狼毒的毒性

1．2 瑞香狼毒化学成分概述

1．2．1 黄酮类

1．2．2 香豆素类

1．2．3 萜类

1．2．4 木脂体类

1．2．5 苯丙素类

1．2．6 其它类

1．3 瑞香狼毒抗肿瘤作用研究

1．3．1 体外抗肿瘤作用

1．3．2 体内抗肿瘤作用

1．3．3 药物血清抗肿瘤作用

1．3．4 临床抗肿瘤作用

1．4 研究意义及研究内容

1．4．1 研究意义

1．4．2 研究内容

第二章 研究方法

2．1 瑞香狼毒根化学成分的提取和分离

2．1．1 实验材料

2．1．2 实验试剂

2．1．3 实验仪器

2．1．4 提取

2．1．5 纯化

2．1．6 分离

2．1．7 HPLC检测

2．2 分离物的结构鉴定

2．3 细胞毒性实验

2．3．1 实验试剂

2．3．2 实验试剂

2．3．3 细胞培养

2．3．4 实验分组

2．3．5 MTT比色法测定化合物A对4种细胞系生长的抑制作用

第三章 结果分析

3．1 高效液相色谱检测结果

3．2 化合物A波谱数据及结构

3．3 新狼毒素A的抗癌活性研究

3．3．1 新狼毒素A对人胚肺成纤维细胞MRC-5的毒性

3．3．2 新狼毒素A对人肺癌细胞NCI-H226的毒性

3．3．3 新狼毒素A对人高转移肺癌细胞95D的毒性

3．3．4 新狼毒素A对人肝癌细胞BEL-7404的毒性

3．3．5 新狼毒素A对4种细胞的毒性比较

3．3．6 讨论

结论

参考文献

附录

致谢