一种新内皮细胞可诱导性粘附分子的表达调变及功能研究

摘要

血小板/T细胞活化抗原1(platelet and T cell activation antigen 1,PTA1)是1997 年基因克隆的新分子,属于免疫球蛋白超家族(IgSF)成员.该文首先发出,LPS刺激后的人 脐静脉内皮细胞(HUVEC)诱导性表达PTA1,为了进一步明确活化内皮细胞PTA1分子的分布和 表达规律、搞清内皮细胞表面PTA1分子所参与的生物学功能及基信号转导机制,研究者进行了以下研究:①采用免疫荧光染色及流式细胞术分析观察活化骨皮细胞及肾综合征出血热病毒感染内皮细胞PTA1的表达规律;②应用ELISA方法检测活化内皮细胞培养上清中可溶性PAT1(Soluble PTA1,sPTA1)的表达规律及其与炎症介质NOT和TNF-α的关系;③应用RT-PCR方法半定量检测活化内皮细胞中PTA1mRNA的含量;④应用免疫电镜胶体金方法观察活化内皮细胞表面PTA1分子的超微分布;⑤应用<'3>H-TdR掺入、PI染色以及<'51>Cr粘附实验等方法观测PTA1分子所参与的内皮细胞生物学功能;⑥应用激光共聚焦显微镜扫描技术PTA1mAb及其二 抗交联对活化内皮细胞浆Ca<'2+>浓度的影响.该研究首次证实PTA1是一种新的内皮细胞可 诱导性表达的粘附分子,明确了内皮细胞表面PTA1分子定位、分布及表达调变规律,阐明了内皮细胞表面PTA1分子所参怀的生物学功能,;初步证实PTA1分子促进胞浆Ca<'2+>水平升 高是参与信号转导的途径之一.

目录

英文缩略词表

ABSTRACT

前言

文献回顾

一、内皮细胞和CD抗原

二、内皮细胞的结构特征、生物学功能及信号转导

三、PTA1的研究进展

实验内容

第一部分PTA1 cRNA探针的制备和初步鉴定

一、实验材料

二、实验方法

三、结果

四、讨论

第二部分PTA1分子在内皮细胞的表达和调变

一、实验材料

二、实验方法

三、结果

四、讨论

第三部分PTA1分子参与内皮细胞的功能

一、实验材料

二、实验方法

三、实验结果

四、讨论

第四部分PTA1诱导胞浆钙离子升高参与信号转导

一、材料与方法

二、结果

三、讨论

小结

致谢

附录

参考文献