胞壁型重组BCG的构建及对小鼠免疫应答的影响

摘要

目的:以屋尘螨抗原Der p2为目标,利用基因工程手段制备以胞壁嵌合形式表达的重组BCG,观察接种该重组BCG对BALB/c小鼠免疫应答的影响.结论:①经改造的Der p2基因可由原核和真核宿主正确表达;②构建的pCW载体能携带外源基因进入分枝杆菌,并调控其在分枝杆菌胞壁上正确表达和定位;③无论rBCG还是BCG通过腹腔注射免疫,均可诱导不同年龄BALB/c小鼠产生Th1免疫应答;④表达在rBCG细胞壁上的Der p2被当成BCG的成份,并为机体的免疫系统所识别,进一步刺激了Der p2特异性的Th1应答.这些结果表明,胞壁型抗原重组BCG可作为有效的疫苗,特异性地调节Th1/Th2平衡.

目录

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英文缩写词表

前言

文献回顾

一.Th细胞亚群的分化与调控

1、人类Th1及Th2亚群的表面标志

2、Th细胞亚群的分化方向

3、Th1/Th2分化调节

4、Th1/Th2优势取向对疾病的影响

二.屋尘螨抗原Der p2研究进展

三.应用BCG调节Th1/Th2平衡治疗过敏性疾病

1.分枝杆菌感染诱导的Th1优势应答抑制了特应性反应

2.分枝杆菌诱导Th1优势应答的机制

3.BCG接种途径和方式对其过敏性疾病的影响

4.重组BCG在过敏性疾病防治中的应用

5.存在的不足：

研究内容

第一部分屋尘螨抗原基因的构建及原核细胞表达

材料和方法

结果

讨论

第二部分屋尘螨抗原基因的真核细胞表达

材料和方法

结果

讨论

第三部分Der p2重组胞壁型E.Coli-BCG穿梭表达载体的构建和鉴定

材料和方法

结果

讨论

第四部分rBCG对BALB/c小鼠Th细胞应答的影响

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

致谢

附录

1.酶反应体系

2.常用菌种基因性状:

3.常用抗生素使用液:

4.各种培养基:

5.培养琼脂（保存于4℃)

6.常用缓冲液系统:

7.酵母系统用缓冲液:

8.主要仪器

9.常用载体图谱: