微载体粘附培养肝细胞的生物学特性及其移植治疗大鼠急性肝衰竭的实验研究

摘要

近年来对急性肝功能衰竭的治疗进展甚微,急性肝功能衰竭病死率依然维持在60％~80%这一令人难以接受的水平.原位肝移植为急性肝功能衰竭的有效疗法.然而,由于供肝短缺、高费用、高风险、技术要求高、术后需终生免疫抑制治疗等缺点,原位肝移植的实施受到了极大的限制.为此研究者们提出体外肝脏灌注、生物型人工肝、肝细胞移植等技术,以期为肝功能衰竭患者度过肝脏供体等待期或为肝脏自行修复提供代谢支持.与OLT比较,肝细胞移植操作技术简单、侵袭性小、费用相对低廉、风险小,移植肝细胞可发挥肝脏解毒、合成功能.因此,肝细胞移植有着良好的发展前景.肝细胞的质与量为肝细胞移植研究中的关键问题,如何方便的获得足够数量和功能良好的肝细胞已成为广大学者关注的焦点.微载体培养技术作为一项体外高密度细胞培养技术,兼有单层培养和悬浮培养的优点,已被用于多种贴壁细胞的培养.该实验对原代SD大鼠肝细胞行微载体粘附培养、观测其生物学特性,并将微载体粘附培养肝细胞移植到D-GalN诱导的急性肝功能衰竭大鼠腹腔内,观察其存活率、肝功能生化指标及肝脏病理改变,以评估微载体粘附肝细胞腹腔内移植的疗效,为肝细胞材料的研究打下一定的实验基础,为微载体粘附培养肝细胞移植的临床应用提供实验依据.结论:胶原酶消化法是肝细胞分离的可行方法,微载体培养肝细胞兼有单层培养及悬浮培养的优点,微载体培养肝细胞在培养第3天有较好功能.腹腔内移植微载体粘附培养肝细胞可对急性肝衰竭大鼠提供代谢支持作用,显著提高急性肝衰竭大鼠的存活率、改善肝功能、减轻肝脏病理改变.

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英文缩写词表

前 言

文献回顾

实验一微载体粘附培养肝细胞生物学特性的研究

实验二微载体粘附培养肝细胞移植治疗急性肝功能衰竭大鼠的实验研究

全文小结

参考文献

附 图

致 谢