胎鼠表皮干细胞的体外分离培养及其在表皮和毛囊再生中的作用

摘要

目的:初步探讨鼠胚胎期表皮干细胞及毛囊乳头层细胞的体外分离培养方法;通过对表皮干细胞及毛囊乳头层细胞的复合立体培养,构建新型鼠皮肤等价物并建立其动物移植模型,观察并探讨移植后表皮干细胞在表皮及毛囊再生中的作用;初步探讨表皮干细胞的基因可操作性及转染外源性基因在皮肤干细胞示踪研究中的可行性.结论:通过Ⅳ胶原快速贴附法可初步实现鼠胚胎期表皮干细胞的体外分离及传代培养;胎鼠毛囊乳头层细胞可通过培养组织培养获得且在立体培养系统中生长稳定;通过动物模型证实表皮干细胞在移植后可形成新的较完整的表皮组织,且在毛囊乳头层细胞的诱导下可形成新的毛囊结构,说明表皮干细胞可分化形成新生表皮及毛囊中所有类型的上皮细胞,而毛囊乳头层细胞则是新生真皮细胞类型的主要来源,这为在此基础上构建新型皮肤组织替代物提供了参考资料;以表皮干细胞为靶细胞进行基因转染及相关研究是可行的,但其稳定性尚待进一步探讨,真核表达载体pIRES2-EGFP不能用于表皮干细胞的示踪性研究.

目录

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英文缩略词表

前言

实验仪器及试剂

第一部分胎鼠表皮干细胞的体外分离培养

一、方法

二结果

三讨论

附图

第二部分表皮及毛囊再生裸鼠模型的建立

一方法

二结果

三讨论

附图

第三部分胎鼠表皮干细胞的体外基因转染

一方法

二结果

三讨论

附图

结论

文献回顾

一什么是干细胞

二创面愈合与皮肤干细胞的关系

三皮肤干细胞

四表皮干细胞和毛囊等皮肤附件的关系

参考文献

致谢