转化生长因子β1对哮喘气道重建的研究（转化生长因子β1对大鼠支气管平滑肌增殖的作用）

摘要

我们以MTT法和流式细胞仪检测体TGF-β对体外培养的气道平滑肌的增殖的作用,了解TGF-在哮喘气道重建的一个重要方面,气道平滑肌增生的直接作用.MAPK途径和PI-3K信号传递系统对气道平滑肌细胞进入S期有重要作用,是ASM细胞增殖的重要的信号转导途径.因此该试验通过MTT和流式细胞仪的方法观察TGF-β1对体外培养的大鼠ASM细胞增殖作用.应用特异性细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)抑制剂U-0126或PI-3K抑制剂LY294002阻断细胞增殖的信号转导途径,观察TGF-β1诱导的大鼠ASM细胞增殖中可能的信号转导途径,从而更深一步了解TGF-β1诱导的哮喘气道重建的机制.一、转化生长因子β1对大鼠支气管平滑肌增殖的作用 应用体外培养的方法,加入不同浓度的TGF-β1,通过MTT法和流式细胞仪观察其对ASMC增殖的影响.二、TGF-β1诱导的大鼠ASM细胞增殖的信号转导途径 在该研究中,MTT法和免疫组化图像分析结果显示:预先30min加入U-0126明显抑制了10μg·L<'-1>TGF-β1诱导的ASMC增殖.预先30min加入LY294002对ASMC增殖有抑制作用,但统计学上无差别.结论:1.TGF-β1增加了体外培养的ASMC中S期和G2期细胞占总细胞数的百分比.2.TGF-β1对气道平滑肌的增殖有明显的促进作用.3.TGF-β1主要通过MAPK途径诱导ASMC增殖,ERK 1/2是关键的信号转导分子.4.在一定浓度范围内,TGF-β1诱导的phospho-ERK 1/2表达有剂量-效应关系,TGF-β1浓度越高phospho-ERK 1/2表达越多,ASMC增殖越明显.5.TGF-β1能诱导ASMC的phospho-ERK 1/2持续表达,这对于ASMC增殖是至关重要的.

目录

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缩略语表

前言

文献回顾

一 支气管哮喘的气道重建

二 TGF-β的生物学功能

第一部分转化生长因子β1对大鼠支气管平滑肌增殖的作用

1 材料和方法

2 实验结果

3 讨论

第二部分TGF-β1诱导的大鼠ASM细胞增殖的信号转导途径研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

小 结

参考文献

个人简历和攻读学位期间的研究成果

致 谢