天然抗角蛋白单克隆抗体3B4的多反应性鉴定及其分子机制的初步探讨

摘要

本课题组应用未免疫小鼠B细胞与骨髓瘤细胞融合，己成功筛选到了3株分泌抗角蛋白IgM抗体的杂交瘤细胞株，其可变区基因与胚系基因高度同源。这些更具天然属性的未免疫小鼠杂交瘤抗体的获得为我们进一步探讨AK auto Ab的特性和生物学作用等提供了非常好的实验材料。 利用软件对VH、VL的基因和氨基酸序列进行分析，找出可能与多反应性有关的关键基因(序列)或氨基酸(序列)，利用“快速PCR法”对其进行突变。再次诱导表达含有突变子的单链载体pscFv，收获、浓缩上清，鉴定其反应特异性的变化，进而分析、探讨多反应性的分子机制。 本研究证明了天然抗角蛋白单克隆抗体3B4具有多反应性，并表明多反应性是一种通过可变区实现的免疫识别、结合反应而不是非特异性反应。

目录

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资助

缩略语表

前言和文献回顾

1天然自身抗体研究进展

2NAA多反应性的研究进展

3AK auto Ab的研究进展

4抗体的基因工程技术

第一部分3B4的多反应性的鉴定

1 材料

2 主要试剂的配制

3 实验方法

4结果

5讨论

第二部分噬菌体呈现的3B4单链抗体的构建及表达

1材料

2 主要试剂

3 主要试剂的配制方法

4 方法

5 结果

6讨论

第三部分mAb3B4可变区分析及定点突变对噬菌体单链抗体多反应性的影响

引言

1 材料

2方法

3结果

4讨论

小结

参考文献

附录

个人简历及攻读学位期间发表文章题录

致谢