亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性快速分析系统的建立

摘要

C677T分布频率存在种族及地区差异，在非洲撒哈拉地区及加拿大北部人群T等位基因频率最低，而南欧及南美人群分布频率最高。C677T多态性是多种疾病的独立风险因子。 本研究基于TDI-FP技术建立了C677T基因型分析新方法，采用PCR扩增了含677位点的MTHFR基因片段，PCR-RFLP筛选获得不同等位基因型的扩增产物，构建了检测系统的对照质粒，并用来建立基因分型方法及反应条件的优化，利用所建立的新方法分析了C677T多态性在中国人群的分布频率。结果显示：与PCR-RFLP技术相比，本方法准确性显著提高，具有更广泛的应用范围。为使该方法更方便应用于临床实验室，我们编写了软件使实验设置及条件设定极大简化，自动化操作将节省操作及操作人员培训时间。

目录

独创性声明及保护知识产权声明

缩略语表

前言

文献回顾

一、MTHRF基因多态性研究进展

二、单核苷酸多态性及分析技术的研究进展

1单核苷酸多态性概述

2SNP发现及分析技术

1 MTHFR C677T荧光偏振检测方法的建立

1.1 材料及设备

1.2 方法

1.3 结果

1.4 讨论

2 C677T多态性TDI-FP检测方法的应用及自动化

2.1 材料及设备

2.2 方法

2.3 结果

2.4 讨论

小结

参考文献

发表论文

致谢