部分代谢综合征组分对肾小管上皮细胞影响的实验研究

摘要

本研究观察了不同浓度葡萄糖、胰岛素和尿酸在培养条件下对猪近端肾小管上皮细胞株(LLC-PK1)细胞内血红素氧合酶(HO-1)活性，以及胰岛素、尿酸对此肾小管上皮细胞内cAMP水平和Na+、K+、细胞内Ca2+及Na+-K+-ATP酶活性的影响。 研究方法： 1、不同浓度葡萄糖、胰岛素和尿酸作用于LLC-PK1细胞48h后，测定HO-1的活性。 2、不同浓度胰岛素和尿酸作用于LLC-PK1细胞24h后，测定LLC-PK1细胞内cAMP水平、Na+-K+-ATP酶活性的改变以及离子转运情况。 研究结果： 1、与5mM相比(0.65±0.10μmol/L)，10mM，22mM和33mM(0.68±0.12μmol/L，0.73±0.11μmol/L，0.70±0.10μmol/L)葡萄糖刺激LLC-PK1细胞48h后，LLC-PK1细胞的HO-1活性无差异(P值均大于0.05)。 2、与尿酸为0mM相比(0.65±0.12μmol/L)、0.1mM、0.2mM和0.4mM尿酸刺激48h后，LLC-PK1的HO-1活性均显著增加(0.93±0.29μmol/1.65±0.49μmol/L,2.53±0.73μmol/L)；且尿酸浓度和HO-1活性增加呈剂量相关关系(r=0.849，P＜0.01)。 3、浓度为10-9M，10-8M，10-7M的胰岛素分别刺激LLC-PK1细胞48h后与0M相比，其HO-1活性无改变(0.65±0.12μmol/L比0.66±0.12μmol/L，0.67±0.13μmol/L.0.66±0.11μmol/L，P值均大于0.05)。 4、不同浓度尿酸作用24h后LLC-PK1细胞cAMP、细胞内Ca2+、Na+浓度随着尿酸浓度的增加而增加，与0mM相比差异显著(P＜0.05)；而Na+-K+-ATP酶活性、K+则与前者刚好相反，它们随着尿酸的浓度增加而降低，与0mM比较有统计学差异(P＜0.05)。 5、不同浓度胰岛素孵育LLC-PK1细胞24h后cAMP水平、Na+-K+-ATP酶活性及细胞Ca2+、Na+、K+浓度发生改变，结果显示细胞Ca2+、Na+浓度随着胰岛素浓度的增加而增加，与对照相比差异有统计学意义(P＜0.05)；而cAMP水平、Na+-K+-ATP酶活性、K+则随着胰岛素浓度的增加而降低，与0M比较亦有统计学差异(P＜0.05)。 研究结论： 1、一定浓度的尿酸在一定时间范围使LLC-PK1细胞HO-1的活性升高，提示尿酸在细胞水平对肾小管上皮细胞的氧化应激过程产生影响。 2、尿酸在刺激LLC-PK1细胞24h后，生理浓度及略高于生理浓度的尿酸刺激LLC-PK1细胞即可引起cAMP水平、细胞Ca2+、Na+浓度升高，Na+-K+-ATP酶的活性和K+浓度下降，说明尿酸对肾小管上皮细胞信号系统及离子转运有明显的影响。 3、随着胰岛素浓度的增加，细胞Ca2+、Na+的浓度也增加；而cAMP水平、Na+-K+-ATP酶活性、K+则随着胰岛素浓度的增加而降低。

目录

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缩略语表

文献回顾

第一部分实验代谢相关因素对猪近端肾小管上皮细胞株血红素氧合酶-1的影响

第二部分实验尿酸和胰岛素对猪近端肾小管上皮细胞株cAMP水平和Na+-K+-ATP酶活性的影响

小结

参考文献

个人简历及研究生期间发表文章

致谢