养阴抗毒胶囊及拆方对阴虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素细胞和血清CORT,SOD,MDA的影响

摘要

目的：
　　本实验以氢化可的松造成阴虚大鼠模型，观察养阴抗毒胶囊(YC)及拆方对阴虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞的免疫组织化学变化，以及对血清皮质醇(CORT)，超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响。探讨YC对HPA轴抑制大鼠模型的作用和机理，为临床进一步应用YC治疗GC不良反应提供实验依据。
　　方法：
　　实验1：观察养阴抗毒胶囊(YC)及拆方对阴虚大鼠垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)细胞的影响
　　清洁级健康雄性SD大鼠40只(体质量200±20g)，随机分为4组，即：正常对照组，阴虚模型组(YD)，养阴抗毒胶囊(YC)组和拆方抗毒组（大小蓟、槐花），每组10只．YC胶囊内粉末进行再次粉碎，过100目筛，加入蒸馏水后超声振荡成5mg/mL的混悬液，拆方抗毒组颗粒剂在临用前加入蒸馏水配制成浓度为5mg/mL的混悬液，YC、拆方抗毒组颗粒剂按成人剂量的25倍，7.5g/d，按平均200g/只计算，0.5g/只，用蒸馏水稀释至0.2g/ml.每天早晨给予2ml/d相应的药液灌胃，空白对照组及YD组给予2ml/d的蒸馏水灌胃，共3d。第4日起除空白对照组外，其余各组均按阴虚大鼠模型复制方法，每日17:00按50mg/kg剂量给予氢化可的松灌胃，连续4d，空白对照组给予2ml/d的蒸馏水灌胃，大鼠在造模结束ld后（第9日），各组同期断头处死，2min内取出垂体，用4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，按ABC法做ACTH免疫组化染色。
　　实验2：养阴抗毒胶囊对阴虚大鼠CORT、SOD和MDA的影响
　　模型复制如实验一，各组均在造模结束ld后（第9日）08:00-09:00间，以Iml/kg剂量速眠新Ⅱ麻醉后心脏取血，测定血清SOD MDA、CORT的含量。SOD含量测定用黄嘌呤氧化酶比色法，MDA含量测定用硫代巴比妥钠比色法，CORT含量用放射免疫法(RIA)。
　　结果：
　　1、ACTH细胞免疫组织化学观察结果：
　　ACTH细胞多为不规则形，细胞核呈圆形，未着色，ACTH阳性免疫物胞浆着色，替代对照未见阳性物质。免疫组化染色结果显示，对照组ACTH在垂体前叶内广泛表达，免疫组化阳性反应较强，每个视野阳性细胞数比值95±27.3，YD组与空白对照组相比ACTH表达增多，每个视野阳性细胞数比值157±67.8(P<0.05)，提示阴虚模型建立成功。YC组较YD组ACTH表达减少，每个视野阳性细胞数比值102±37.5(P<0.05)，而拆方组无明显差异，每个视野阳性细胞数比值145±47.8。
　　2、对大鼠血清CORT，SOD和MDA结果：
　　YD组血清CORT含量明显高于正常对照组(P<0.05)，说明动物模型复制成功。YC组CORT含量低于YD组(P<0.05)，提示YC对外源性GC所致阴虚大鼠血清CORT亢进有一定抑制作用，而拆方抗毒组无明显变化，差异无统计学意义(P>0.05，)；与正常对照组相比，YD组SOD活性明显降低，MDA含量明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)，与YD组相比，YC组大鼠血清SOD活性明显升高，MDA含量明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)，而拆方抗毒组无明显变化，差异无统计学意义(P>0.05)。
　　结论：
　　YC组中药能够明显降低阴虚大鼠垂体ACTH的表达，抑制HPA轴功能亢进状态，提高大鼠血清中SOD活性，降低MDA含量，使机体的氧化与抗氧化系统恢复平衡，从而缓解肾上腺功能亢进症状，达到滋阴清热，改善阴虚状态的功效，为临床进一步应用YC治疗GC不良反应提供了实验依据。

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