胱硫醚-γ-裂解酶在大鼠耳蜗的分布及噪声刺激后的表达变化

摘要

目的：
　　随着城市化和工业化程度的不断提高，噪声对人体的危害日趋增大，长期接触噪声可以对人体许多系统产生不良影响，尤以听觉器官损害最为突出。大量研究显示，内耳微循环障碍，是噪声导致耳聋的主要因素。因此，对耳蜗微循环的研究一直是耳科界关注的热点问题。近年来，硫化氢（H2S）等气体信号分子成为改善血管微循环障碍的重要研究方向。基于内源性的H2S的生理特性及血管效应，以及噪声性听力损伤过程中耳蜗血管微循环障碍的理论，我们从H2S在大鼠耳蜗的分布及调节功能入手，观察了胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase，CSE）在大鼠耳蜗的分布及在噪声刺激后的表达变化，为进一步探讨硫化氢在内耳微循环中的作用、防治噪声性耳聋方面提供实验思路和依据，为预防和治疗与微循环障碍相关的内耳疾病开辟新的途径。
　　方法：
　　通过免疫组织化学及免疫荧光染色技术，观察CSE在正常成年SD大鼠耳蜗内的分布及定位。噪声暴露采用32只SD大鼠，随机分成4组：正常对照组、1天组、1周组、3周组，后3组分别暴露于110dBSPL宽带白噪声中。噪声暴露后采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测大鼠接受强噪声刺激前后CSEmRNA在耳蜗内的表达变化。
　　结果：
　　免疫组织化学及免疫荧光显示CSE主要表达在大鼠耳蜗的血管纹以及耳蜗微小血管处；在耳蜗内外毛细胞，各类支持细胞，盖膜、蜗神经节处未见明显表达。RT-PCR结果显示随着噪声刺激时间的延长，CSE在mRNA水平的表达呈先增长后下降的趋势。
　　结论：
　　CSE在耳蜗内有明确的表达，在噪声刺激前后可能参与了耳蜗微循环的调节，提示其在改善耳蜗血循环方面可能发挥重要作用。以上研究为噪声性聋的发病机理、预防及治疗提供一种新的思路。

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前言

文献回顾

1 噪声的基本概念

2 噪声性聋的病因

3 发病机制

4 噪声性听觉损伤的机制

5 噪声性聋的预防及治疗

6 噪声性聋模型的研究进展

内源性硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶的研究进展

1 硫化氢的特性

2 内源性硫化氢的生理功能

胱硫醚-γ-裂解酶在大鼠耳蜗的分布及噪声刺激后的表达变化

实验一：胱硫醚-γ-裂解酶在大鼠耳蜗的免疫组织化学与免疫荧光观察

实验二 噪声性模型的建立

实验三：RT-PCR 检测 CSE 基因在噪声刺激前后的变化

小结

参考文献

致谢