多聚糖止血颗粒对兔股动脉离断及肝创伤出血的止血效果观察

摘要

目的：
　　大动脉破裂（ArteryRupture）出血迅猛，常导致失血性休克甚至死亡，历来是平战时火线急救的薄弱环节。因此无论火线或院前急救都需要一种既能快速、有效止血，又能减轻止血过程对患肢血循环造成的不利影响的止血方法。外科手术中创面出血或渗血是十分常见的问题，传统止血方法存在操作时间长，微细出血处止血不够彻底的弊端，因此，外科手术需要一种快速、方便、并发症少的止血方法。PerClotTM多聚糖止血颗粒（PolysaccharideHemostaticSystemPHS）是一种新型手术止血材料，有效成分为可吸收性变性淀粉聚合物（AbsorbableModifiedPolymerAMP）。在活动性出血部位加入PerClotTM后，PerClotTM颗粒快速地吸收血中的水分子，而颗粒的孔径控制在可以将血小板，红细胞和血浆蛋白等成分阻隔在颗粒表面使之颗粒表面聚集，从而减少出凝血时间。体内的PerClotTM可在几天内被降解。因此PerClotTM被认为适合各种组织的大出血及弥漫性出血患者及抗凝患者，血小板功能低下等特殊患者。
　　本课题选择PerClotTM对兔股动脉离断及肝创伤出血的止血作用作为研究的重点，以目前我军应用较为广泛的止血材料云南白药粉为阳性对照，肉眼观察其止血效果，并在光镜下观察PerClotTM的降解情况和其对创面愈合的影响，为PerClotTM治疗急性出血提供理论和实验依据。
　　方法：
　　方法一12只新西兰兔随机分为受试药物PerClotTM组及空白对照组.解剖分离兔左侧股动脉.并用眼科剪剪断股动脉，PerClotTM组立即于出血部位施以PerClotTM，以棉球按压，并计时.空白对照组仅以纱布按压.按压60s后每隔30s移开棉球，观察各组动物止血效果。10分钟后，取下该棉球（或纱布）备用。观察活动患肢对止血稳定性的影响，探查伤口内血凝块形成情况以及动脉破口堵塞血块是否容易脱落，导致继发性出血.待棉球（或纱布）上材料、血液干燥后精确称量棉球质量，计算出血量。
　　方法二24只新西兰兔，随机为受试药物PerClotTM组，阳性对照组及阴性对照组。在兔肝脏右中叶中下部做直径0.5*0.5cm，深度0.3cm标准的创面建立出血模型，PerClotTM组每个出血创面均使用药物200mg；阳性对照组每个出血创面均使用云南白药200mg；阴性对照组每个出血创面仅用纱布按压。按压90s、120s、180s时，移开棉球，观察各组动物止血效果。30分钟后，取下该棉球（或纱布）称量，计算出血量。各受试组分别于手术后1d、3d、7d、14d麻醉处死2只，采用碘着色法（利用碘遇淀粉呈篮紫色原理）对肝脏创面染色，观察止血材料的降解情况及腹腔粘连情况后，取创口部位组织用l0％的甲醛溶液固定，石蜡包埋，制成厚50μm的切片，用于病理观察。
　　实验结果：
　　实验一结果统计分析后可知，在出血量方面两种止血方式均可起到完全止血的效果。平均出血量如下：PerClotTM组：（1.46±0.06）g；阴性对照组（2.48±0.10）g。统计分析后可知PerClotTM组较阴性对照组出血量减少（P<0.01）。在止血时间方面两种止血方式的平均止血时间如下：PerClotTM组：（100±30.1）s；阴性对照组（200±36.33）g。统计分析后可知PerClotTM组较阴性对照组止血时间减少（P<0.01）。在观察止血稳定性时我们发现：所有实验动物在活动患肢时均未出现再出血。但是在探查伤口时发现，用生理盐水冲洗伤口后PerClotTM粉末形成不溶于水的胶状物，可以与纱布棉球等紧密结合，但与动脉破口处的结合并不如是。此时如取下敷料的动作粗暴，易将胶状物联同动脉破口处血凝块一并取下，导致再出血。动脉破口处与PerClotTM共同形成的血凝块也易于被剥离，导致再出血。经过摸索，在实验中我们发现：延长清创时间，取下敷料时用先用生理盐水浸润并尽量缓慢操作可以减少再出血的发生机率。
　　实验二结果各实验组在出血量方面：三种止血方式均可在180s内起到完全止血的效果。平均出血量如下：PerClotTM组：（0.12±0.46）g；阳性对照组（0.48±0.14）g；阴性对照组（1.24±0.11）g。统计分析后可知PerClotTM组较阴性对照组出血量减少（P<0.01）；云南白药相对纱布按压能起到减少出血量的作用（P<0.01）。PerClotTM组在减少出血量方面效果优于阳性对照组（P<0.01）。大体可观察到PerClotTM组中洒于创面的PerClotTM不但可以可有效解决创面渗血问题。PerClotTM于3～7d内完全降解，3d、7d与14d剖腹探查时未见或仅见轻微腹腔脏器粘连。阳性对照组中洒于创面及创面周围的云南白药于止血后难以完全洗净，剖腹探查时发现该组肝表面均与腹膜粘连，但手指可分离，14d时我们发现部分阳性对照组肝表面与腹膜粘连严重，无法分离。阴性对照组腹腔也存在粘连，但较阳性对照组为轻。光镜下观察发现：术后3d，阳性对照组中创面周围纤维结缔组织增生明显，大部分纤维蛋白基质逐渐被包含有纤维母细胞，巨噬细胞的血管颗粒组织所取代。PerClotTM组中洒于创面的PerClotTM已降解，细胞规整，血管少。光镜下观察结果与大体观察相符（图15、16）。
　　结论：
　　PerClotTM多聚糖止血颗粒能够迅速有效地止血，减少肢体大动脉破裂止血的止血时间（P<0.01）和创面出血量（P<0.01），又能有效地减少创面渗血（P<0.01）。由于其不溶于水，降解时间适中的特性，短期内局部不会因为止血材料被溶解或降解造成再出血，止血效果可靠。术后，PerClotTM仅在局部造成轻微粘连，说明该材料具备较好的组织相容性。如应用临床，将大大增加肢体大动脉破裂患者的生存率，有效减少肝胆手术术中及术后出血，降低肝破裂急诊手术的危险。

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缩略语表

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前言

文献回顾

1、生理性止血机制

2、传统止血方法

3、新型止血材料及其应用

4、多聚糖止血颗粒的止血原理及临床应用

正文

实验一 多聚糖止血颗粒对兔股动脉出血的止血效果观察

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

实验二 多聚糖止血颗粒对兔肝脏创伤止血效果的观察

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

小结

参考文献

附录

个人简历和研究成果

致谢