胰岛素对βTC-3细胞胰岛素受体及其结合的G蛋白表达的影响

摘要

目的：
　　观察外源性胰岛素对小鼠胰岛β细胞瘤细胞株βTC-3细胞胰岛素受体及其结合的G蛋白（Gαo）表达的影响。
　　方法：
　　1．采用免疫荧光细胞化学技术结合激光扫描共聚焦显微镜观察高浓度胰岛素（100μIU/ml）作用不同时间（0min、30min、60min、120min、240min），培养的βTC-3细胞胰岛素受体的表达，用Imageproplus软件对胰岛素受体的荧光强度进行半定量分析。
　　2．运用免疫共沉淀结合蛋白质印迹方法观察，高浓度胰岛素（100μIU/ml）作用于不同时间（0min、60min、240min）βTC-3细胞胰岛素受体及其结合的Gαo蛋白表达，用Bandscan软件对胰岛素受体及其结合的Gαo表达进行灰度扫描并半定量分析。
　　结果：
　　1．与0min相比较，胰岛素孵育30min、60min、120min和240min时胰岛素受体荧光强度明显下降（P﹤0.05），均有统计学意义；
　　2．胰岛素受体的表达：与0min相比较，胰岛素作用60min和240min时胰岛素受体的蛋白表达显著下降（P﹤0.05），均有统计学意义；与胰岛素受体结合的Gαo蛋白表达：与0min相比较，胰岛素作用60min时，Gαo蛋白表达明显升高（P﹤0.05）；胰岛素作用240min时，Gαo蛋白表达显著下降（P﹤0.05），均有统计学意义。
　　结论：
　　1.高浓度胰岛素孵育βTC-3细胞后，可明显下调胰岛素受体的表达，这可能是胰岛素抵抗产生的机制之一。
　　2．高浓度胰岛素孵育βTC-3细胞后，可明显下调胰岛素受体的表达，与胰岛素受体结合的Gαo蛋白的表达先升高后下降，Gαo表达变化可能与胰岛素受体的功能调节有关。

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前言

文献回顾

1．胰岛素的有关研究

2．胰岛素受体（insulin receptor，IR）

3．胰岛素信号传导途径

4．G 蛋白

5．G 蛋白的信号转导途径

6．受体酪氨酸激酶途径与 GPCR 途径的交叉与糖尿病

正文

实验一 胰岛素对 βTC-3 细胞胰岛素受体表达的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

实验二 胰岛素对 βTC-3 细胞胰岛素受体及其结合的 Gαo 表达的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

小结

参考文献

附录

个人简历和研究成果

致谢