渐进性咬合紊乱对大鼠髁突软骨中IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响

摘要

本课题组前期研究已证实：移动大鼠磨牙建立渐进性咬合紊乱，可以引起大鼠髁突软骨发生退行性改变。细胞因子在软骨组织生长发育、功能维持以及损伤修复等过程中发挥着重要作用。本研究旨在探讨渐进性咬合紊乱致大鼠髁突软骨异常改建过程中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达变化情况。
　　实验方法：
　　32只8周龄雌性SD大鼠，随机分为2个实验组和同龄2个空白对照组（n=8），同环境下饲养。实验组大鼠第一、第二和第二、第三磨牙之间填塞正畸用橡皮筋以推第一、第三磨牙移动约0.8mm，建立渐进性咬合紊乱模型。空白对照组不做任何处理，同环境下饲养直至实验结束，分别于8周和12周后取双侧颞下颌关节。用HE染色观察大鼠髁突软骨组织形态变化，免疫组化及RT-PCR方法检测IL-1β、IL-6和TNF-α的表达情况。
　　实验结果：
　　1.对照组大鼠髁突软骨各层细胞排列整齐，界限清晰，分为纤维层，增殖层，肥大层和钙化软骨层。实验组髁突出现了典型的退行性变，表现为：软骨细胞层次排列紊乱，细胞核固缩，软骨细胞凝固性坏死，软骨细胞数量减少，软骨组织局部出现无细胞区。8周实验组8个关节中有4个出现了典型的退行性变，12周实验组8个关节中有6个出现了典型的退行性变，随着实验时间的延长这些退行性改变有逐渐加重的趋势。
　　2.免疫组化染色结果：IL-1β、IL-6和TNF-α均为胞浆着色，阳性细胞主要分布于髁突软骨细胞肥大层。这三种炎性因子在实验组髁突软骨的无细胞区着色均消失。
　　3.PCR结果：8w,12w两时间点之间比较：对照组IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均未见明显差异（P>0.05）；实验组IL-1β的表达也未见随时间的变化（P>0.05）；TNF-α12周实验组较8周组降低（P=0.004）；IL-6的表达虽有同样趋势，但未见统计学差异（P>0.05）。实验组与对照组比较：8周实验组与8周对照组相比IL-6（P=0.009）和TNF-α（P=0.001）的表达均升高，但12周实验组和12周对照组之间均未见明显差异（P>0.05）。
　　结论：
　　1.移动大鼠磨牙可以导致大鼠髁突软骨出现退行性病变。
　　2.本实验早期IL-6和TNF-α参与了实验性咬合紊乱所致髁突软骨异常改建活动，但在观察期内IL-1β没有明显参与的迹象。

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缩略语表

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前言

文献回顾

1 颞下颌关节和髁突软骨

2 骨关节炎

3 咬合紊乱与颞下颌关节紊乱病

4 细胞因子在骨关节炎软骨病变中的作用

正文

实验一 渐进性咬合紊乱对大鼠髁突软骨组织形态的影响

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

5 结论

实验二 渐进性咬合紊乱对大鼠髁突软骨组织中IL-1β、IL-6 和 TNF-α表达的影响

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

5 结论

小结

参考文献

附录

个人简历和研究成果

致谢