利用SSR及IT--ISJ分子标记技术分析梨砧木种质资源的遗传多样性

摘要

应用SSR和IT-ISJ分子标记技术对74种梨砧木和野生种质资源材料进行了遗传多样性分析，结果表明: 40对SSR引物扩增得到225个等位基因，平均每对引物扩增得到5.625个等位位点，其中多态性条带200条，多态性比率为88.89％。可以区分全部样本。聚类分析结果显示，74份样本的相似系数的变化范围为0.510-0.985，表现出较高的遗传多样性。供试品种在相似系数0.68处被分为7大类群，与品种的系谱来源和地理分布基本吻合。 12对IT-ISJ特异性引物共检测出110个等位基因位点，平均每对引物9.166个位点，其中多态性条带81条，多态性比率为73.64％。供试的74份种质资源相似系数的变化范围是0.494-0.975，平均0.735，在相似系数为0.735处，可将74种材料分为5个类群，亲缘关系树状图与基于SSR数据绘制的聚类树相近但不完全相同。 45份试材形态学数据也表现出较高的遗传多样性。与SSR及IT-ISJ数据比较发现，试材间的形态学差异大多可得到SSR或IT-ISJ分析结果的支持，但形态学数据较难量化，部分资源形态学数据差异不明显，难以直接分类或计算遗传多样性，分子标记是其有效补充。

目录

声明

摘要

引言

文献综述

1 分子标记技术概况及在果树上的应用

1．1 分子标记技术分类

1．2 分子标记发展概况

1．3 分子标记技术在果树上的应用

2 梨砧木培育与使用概况

2．1 梨异属砧木育种及应用进展

2．2 梨属矮化砧木选育进展

2．3 梨野生种质资源

3 梨遗传多样性研究进展

研究目的与意义

第一章 梨种质资源遗传多样性的SSR分析

1．1 试材

1．2 主要仪器和试剂

1．2．1 主要仪器

1．2．2 主要试剂

1．3 试验方法

1．3．1 梨基因组DNA的提取

1．3．2 基因组DNA纯度和浓度的检测

1．3．3 梨SSR银染技术体系的建立

1．3．4 SSR引物序列的获得及筛选

1．3．5 统计分析

1．4 结果与分析

1．4．1 基因组DNA纯度和浓度的检测

1．4．2 SSR引物筛选

1．4．3 多态性分析

1．4．4 聚类结果分析

1．5 讨论

第二章 梨砧木及野生资源遗传多样性IT-ISJ分析

2．1 试验材料

2．2 试验方法

2．2．1 DNA提取

2．2．2 IT-ISJ-PCR反应体系和扩增程序

2．2．3 引物筛选

2．2．4 PCR结果检测

2．2．5 数据分析

2．3 结果与分析

2．3．1 IT-ISJ引物筛选

2．3．2 多态性分析

2．3．3 聚类分析

2．4 讨论

第三章 梨砧木及野生资源形态学观测及分析

3．1 试验材料

3．2 试验方法及结果

3．2．1 形态学指标

3．2．2 部分试材一年生枝图片

3．3 讨论

小结

参考文献

缩略词表

致谢