鼻咽癌精确放疗后远处转移分析及分子机制研究

摘要

目的：
　　回顾我科鼻咽癌患者临床资料，分析鼻咽癌精确放疗后的生存，预后及影响远处转移的因素，探讨鼻咽癌远处转移分子机制及临床危险因素。前期采用高通量全基因组芯片筛选技术发现鼻咽癌转移组织中MAZ高表达。但鼻咽癌患者放疗后转移是否与MAZ高表达有关，目前尚不清楚，为此，我们在扩大鼻咽癌组织标本量基础上通过免疫组化验证MAZ表达与临床结果的相关性；通过Real-time PCR和Western Blot检测MAZ在鼻咽癌高低转移细胞系表达；在细胞系中验证MAZ具有促进鼻咽癌转移的作用，并初步探讨MAZ参与鼻咽癌转移的分子机制，为临床防治鼻咽癌转移提供新的靶点和策略。
　　方法；
　　1.收集2006.01-2011.10西京医院放疗科233例来自中国西北地区鼻咽癌患者，所有患者治疗前均行鼻咽颅底全颈CT或MRI扫描，全程接受IMRT放疗或联合以铂类为主的化疗。
　　2.收集80例鼻咽癌患者鼻咽部肿瘤组织标本，利用免疫组织化学法检测MAZ表达，分析MAZ与临床资料和预后的相关性；通过Real-time PCR和Western Blot检测MAZ在鼻咽癌高低转移细胞系表达。
　　3.构建MAZ慢病毒载体，转染鼻咽癌细胞SUNE1-5-8F和SUNE1-6-10B。采用Transwell和划痕实验检测MAZ对鼻咽癌细胞侵袭、转移能力的影响。
　　4.采用免疫共沉淀（Co-IP）、Real-time PCR和Western Blot检测MAZ表达与c-Myc的相互作用及下游转移相关基因的表达。
　　结果：
　　1.本组鼻咽癌患者5年的无进展生存率、总生存率、无远处转移生存率及无局部区域复发生存率分别为56.8％、68.2%、68.7%及92.8%。全组病历中死亡74例，肿瘤相关死亡67例，占全部死亡病例的90.5%，其中有14例（20.9%）因鼻咽部位大出血死亡，53例（79.1%）死于远处转移。治疗后局部区域复发26例（11.2%），远处转移64例（27.5%），远处转移是鼻咽癌放疗失败的主要原因，单因素及多因素分析均显示：N分期是影响无远处转移生存率的独立危险因素。
　　2.免疫组织化学染色显示，转移组鼻咽癌组织中MAZ表达明显高于无转移组（P<0.01），与芯片筛选结果一致；MAZ表达与临床资料相关性分析显示：在远处转移组鼻咽癌组织中，MAZ表达升高与N分期有关（P<0.05）。Real-time PCR和Western Blot检测显示，MAZ在高转移鼻咽癌细胞系呈高表达。
　　3.成功构建MAZ敲除慢病毒载体稳定表达细胞系，敲除MAZ可抑制鼻咽癌的转移及侵袭能力。
　　4.免疫共沉淀（Co-IP）、Real-time PCR和Western Blot提示MAZ可能通过与c-Myc相互作用，促进鼻咽癌转移，其作用与调节MMP9、TGF-β以及COX-2表达有关。
　　结论：
　　1.西北地区非高发区鼻咽癌精确放化疗后5年局部区域控制率超过90%，总生存率68.2%，远处转移是其治疗失败主要原因。无远处转移生存率与N分期有关。在高转移的鼻咽癌组织细胞及高转移细胞系中，MAZ的表达显著上调，与鼻咽癌的N分期密切相关。
　　2.MAZ表达促进鼻咽癌细胞的转移及侵袭。
　　3.MAZ可能通过与c-Myc相互作用，并通过调节MMP9、TGF-β以及COX-2促进鼻咽癌的转移过程，是鼻咽癌临床治疗又一新的靶点，具有一定理论指导意义及临床应用价值。

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前言

文献回顾

1. 鼻咽癌常规二维放疗

2. 鼻咽癌精确放疗

3.鼻咽癌放疗后远处转移

4.鼻咽癌转移的分子机制

第一部分 临床研究

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

小结

第二部分 实验研究

1 材料

2方法

3 结果

4 讨论

小结

参考文献

个人简历和研究成果

致谢