板栗花中总黄酮的提取、分离及其农用生物活性研究

摘要

本文分别采用水浴法、超声波辅助提取法和微波辅助提取法，提取了板栗花中的总黄酮，通过分光光度法测定了总黄酮的含量。通过单因素实验和正交实验确定这三种方法提取总黄酮的最佳提取条件。水浴法提取板栗花总黄酮的最佳工艺条件是：65％的乙醇溶液，水浴温度为80℃，水浴选择的时间2 h，固液比为1:40。在该工艺下提取总黄酮的得率可以达到8.483%。微波辅助提取法来提取板栗花中总黄酮的最佳提取条件是:乙醇溶液的体积分数为65%，微波的功率设定900 W，微波设定的温度70℃，微波时间3 min，固液比为1:35。此条件下提取总黄酮的得率是8.207%。超声波辅助提取法提取总黄酮的最优的工艺条件是：45%的乙醇溶液，提取的温度为70℃，超声时间是12 min，固液比为1:40。在此种最佳工艺条件下的总黄酮的得率是8.837%。将三种提取方法进行比较，在得率相差不大的情况下，微波辅助提取法具有更节约实验时间、节约消耗能量、控制操作方便等优点，优于其它提取方法。
　　对板栗花中提取的有效成分用硅胶柱色谱法分离。通过运用简单的薄层色谱，以不同比例的氯仿-甲醇溶液作为展开剂，选择了合适比例的氯仿-甲醇溶液为洗脱剂进行柱色谱分离。将板栗花的粗提取物依次经过石油醚、乙酸乙酯以及正丁醇进行萃取提取有效成分，通过进行抑菌活性实验来筛选出抑菌效果最好的正丁醇层。进而对正丁醇部分进行多级柱色谱分离，最终筛选得到具有较好抑菌活性的组分4和组分5。
　　采用速率生长法对板栗花中的有效成分进行农用生物活性的研究实验。首先对板栗花的粗提取液进行抑菌活性实验，发现其对白菜黑斑病菌、苹果轮纹病菌、黄瓜枯萎病菌、棉花枯萎病菌、小麦全蚀病菌具有一定抑菌活性，对柑橘炭疽病菌的抑菌效果不明显。其次对柱色谱分离的抑菌效果较好的正丁醇层中组分4和组分5抑菌活性实验。结果为：组分4对白菜黑斑病菌、苹果轮纹病菌、黄瓜枯萎病菌、棉花枯萎病菌、小麦全蚀病菌的EC50分别为52.51、174.56、34.98、190.17、135.64 mg/L。组分5对白菜黑斑病菌、苹果轮纹病菌、黄瓜枯萎病菌、小麦全蚀病菌的EC50分别为49.76、925.45、87.96、850.26 mg/L。两组分都对白菜黑斑病菌和黄瓜枯萎病菌具有较好的抑制作用。表明板栗花中的有效成分黄酮类具有一定的农用生物活性。

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第一章 绪 论

1 .1 板栗花中多酚黄酮的研究背景

1 .2 提取方法的介绍

1 .3 板栗花中的有效成分及其分离

1 .4 板栗花提取物的生物活性

1 .5 研究目的和意义

第二章 水浴法从板栗花中提取总黄酮成分的方法研究

2 .1 实验试剂

2 .2 实验仪器

2 .3 实验方法

2 .4 结果与讨论

2 .5 实验结论

第三章 微波辅助法从板栗花中提取总黄酮的方法研究

3 .1 实验试剂

3 .2 实验仪器

3 .3 实验方法

3 .4 实验结果与讨论

3 .5 结论

第四章 超声波法从板栗花中提取总黄酮成分的方法研究

4 .1 实验试剂

4 .2 实验仪器

4 .3 实验方法

4 .4 结果与讨论

4 .5 结论

第五章 板栗花中有效成分的柱层析分离

5 .1 实验试剂

5 .2 实验仪器

5 .3 实验方法

5 .4 结果与讨论

5 .5 结论

第六章 板栗花提取物的农用生物活性测试

6 .1 实验试剂

6 .2 实验仪器

6 .3 供试菌种

6 .4 实验方法

6 .5 结果与分析

6 .6 结论

第七章 结论

参考文献

附录

导师组意见

致谢

作者简介

硕士在读期间发表的文章