比格犬粪便菌群16SrRNA多样性分析及主要益生菌的分离鉴定

摘要

比格犬在生命科学上的研究意义重大，比格犬粪便菌群分析是非常有必要的。本试验对比格犬粪便中微生物的16S rRNA V4区域DNA进行测序，对大量数据进行统计分析，揭示粪便中微生物的种类以及它们之间的相对丰度和进化关系，探讨粪便微生物的多样性。通过分析可知不同年龄段的比格犬粪便菌群的多样性和结构都有所不同。
　　比格犬专用微生态制剂的研究迫在眉睫。本研究从比格犬粪便内分离并选择4株常见益生菌，对其进行分离纯化，形态学、生理生化、分子生物学鉴定及生物学特性研究：生长曲线测定，耐热性、耐酸性、耐胆盐、耐胃液、耐肠液试验。试验结果表明：43号菌为乳白色菌落，有特殊酸味，经鉴定为嗜酸乳酸杆菌（Lactobacillus acidophilus）。18号菌常成对出现，在KF培养基上呈枣红色，经鉴定为屎肠球菌（Enterococcus faecium）。25号菌在培养基上呈不规则圆形，边缘不整齐，有粘滞感，经鉴定为地衣芽胞杆菌（Bacillus licheniformis）。1号菌在WL培养基上绿色，生长速度较慢，经鉴定为热带假丝酵母菌（Candida tropicalis）。实际生产过程中，43号菌、18号菌应当尤为注意加工温度和时间的控制。这四株菌在强酸强碱环境中性能良好，为实际生产应用提供参考。
　　安全性试验显示，这四株菌对小白鼠无致死性，无毒副作用。试验组与对照组小白鼠体重、体温无显著性差异（P>0.05）。25号菌可能对公鼠和母鼠肾脏有促进生长的作用，18号菌对公鼠有促进作用。43号、18号、25号菌对公鼠的脾脏有促进生长的作用。这四种菌对小白鼠肝脏、脾脏、肠均无特异性病理变化。
　　本试验使用的四株益生菌株都是从比格犬粪便中分离到的，为今后比格犬源益生菌活菌制剂的研究奠定基础。

目录

综述

1比格犬的研究现状

2肠道菌群的作用和犬的肠道群菌群

3益生菌的发展和作用

4微生态制剂的现状

5本研究的目的和意义

试验一 不同年龄段比格犬粪便菌群多样性分析

1材料与方法

2结果

3讨论

4小结

试验二 主要益生菌的分离鉴定

1材料

2方法

3结果

4讨论

5小结

试验三 安全性试验

1材料与方法

2 结果

3讨论

4小结

结论

参考文献

英文缩略词表

致谢

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