枯否细胞封闭对内毒素诱导激活丝裂原活化蛋白激酶的影响

摘要

目的:内毒素通过激活肝脏枯否细胞(Kupffer cells,KCs)丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinases,MAPK)信号转导通路,使其大量分泌释放TNF-α等促炎细胞因子,从而导致肝损伤发生.GdCl<,3>可通过抑制枯否细胞活化,减轻或抑制LPS所致肝损伤,但封闭KCs是否可通过调节其MAPK信号转导通路,实现肝脏保护作用的机制尚未阐明.为此该实验利用小鼠内毒素血症模型,探讨KCs封闭对LPS诱导MAPK信号转导通路的影响.方法:Ⅰ雄性昆明种小鼠在注射LPS(5mg/kg)前48h、24h,分别静脉注射GdCl<,3>(10mg/kg)或等量的生理盐水,于LPS或生理盐水注射后30min,分别取出肝脏或分离KCs,检测肝脏或KCs ERK1/2、p38MAPK蛋白表达及磷酸化水平;Ⅱ体外培养小鼠KCs经GdCl<,3>(100μM)预处理1h,加入含LPS(100ng/ml)的DMEM培养基继续孵育30min,分别检测体外培养KCs ERK1/2、p38MAPK蛋白表达及磷酸化水平和GdCl<,3>对其吞噬、分泌功能的影响.结果:LPS可促进肝脏或KCs ERK1/2、p38MAPK蛋白磷酸化,但对ERK1/2、p38MAPK蛋白表达无明显影响.GdCl<,3>可抑制LPS诱导KCs活化和TNF-α分泌,但不能抑制LPS诱导KCs或肝脏ERK1/2、p38MAPK磷酸化,也不能影响ERK1/2、p38MAPK蛋白表达,KCs经GdCl<,3>单独短时间处理(lh),可使其少量分泌TNF-α.结论:GdCl<,3>可抑制LPS诱导KCs的活化,降低其分泌功能,但KCs封闭并不能通过调节细胞内ERK1/2、p38MAPK信号转导途径,抑制LPS诱导KCs活化及TNF-α释放,而可能是通过其它信号转导途径(JNK、NF-κB、GPCR等)间的相互作用减轻肝损伤.

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前言

部分英文缩写含义

实验一三氯化钆封闭枯否细胞对内毒素激活肝脏丝裂原活化蛋白激酶的影响

材料与方法

结果

实验二三氯化钆封闭体内枯否细胞对内毒素激活其丝裂原活化蛋白激酶的影响

材料与方法

结果

实验三三氯化钆封闭体外枯否细胞对内毒素激活其丝裂原活化蛋白激酶的影响

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述

参考文献

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