硝苯地平对人精子功能影响的体外实验研究

摘要

目的：探讨正常血药浓度下的硝苯地平(nifedipine，NIF)体外对人精子运动功能、顶体反应、精子膜功能完整性及压力敏感性Ca2+内流的影响，为男性不育的诊断、开发新型避孕药以及指导临床用药提供帮助。 方法：本试验共分为四个部分，每部分都分一个对照组、三个加药组共四组进行。第一部分将终浓度为20ng/ml、100ng/ml和20μg/ml的NIF在体外与经上游优化处理的正常生育男性的精子分别共同孵育，同时设立正常对照组，于10、30和60分钟时对它们分别进行精液常规分析。第二部分对第一部分60分钟时的各组精液分别进行低渗肿胀(HOS)试验。第三部分将终浓度为20ng/ml、100ng/ml和20μg/ml的NIF与获能精子孵育60分钟，同时设立正常对照组，然后以孕酮诱发精子发生顶体反应，用特异性荧光标记物——络合异硫氰酸荧光素的豌豆凝集素(FITC-PSA)标记顶体，通过流式细胞仪检测顶体完整性。第四部分将终浓度为20ng/ml、100ng/ml和20μg/ml的NIF在体外与经上游优化处理的正常生育男性的精子分别共同孵育，同时设立正常对照组，于30分钟时用fura-2/AM标记精子细胞内钙离子，用RF-540荧光分光光度计测定蒸馏水稀释前后的荧光强度。 结果：1)第一部分对照、20ng/ml、100ng/ml和20μg/ml四组之间的活力、活率均有明显差异(P＜0.01)，孵育时间和加入NIF的终浓度之间存在交互作用(P＜0.05)。表明随着NIF浓度的升高和孵育时间的延长，精子运动能力呈现不断下降趋势。2)第二部分对照、20ng/ml、100ng/ml和20μg/ml组的精子尾部总肿胀率依次减低，20μg/ml组的精子尾部总肿胀率明显低于对照组，差异具有显著性(P＜0.01)。20μg/ml组的精子尾部总肿胀率明显低于20ng/ml，差异存在显著性(P＜0.05)。其余各组之间无显著性差异。四组的g形精子百分率依次减低，但只有20μg/ml组的g形精子百分率明显低于对照组，差异具有显著性(P＜0.01)，其余各组之间无显著性差异。3)第三部分加入NIF终浓度为20ng/ml、100ng/ml和20μg/ml的精子顶体标记荧光值均明显高于对照组，差异具有显著性(P＜0.01)。20μg/ml组荧光值明显高于前3组，差异存在显著性(P＜0.01)。100ng/ml组荧光值高于20ng/ml组，但无显著性差异。4)第四部分对加入蒸馏水前后的各荧光值分别换算成相同浓度下计算。20ng/ml、100ng/ml和20μg/ml组的精子细胞内Ca2+荧光差值均明显低于对照组，差异具有显著性(P＜0.01)。三个实验组之间精子细胞内Ca2+荧光差值相近，无显著性差异。 结论：治疗剂量的硝苯地平在体外可以抑制人精子运动功能及顶体反应，可以改变精子膜功能完整性，抑制压力敏感性Ca2+内流。所以，在体外治疗剂量的硝苯地平能影响正常男性生育。这就为开发硝苯地平作为女性阴道内外用避孕药提供理论依据。

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前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

·综述1·钙离子及电压依赖性钙通道阻滞剂对精子的影响

·综述2·免疫性不育相关精子抗原研究进展*

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