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临汾地区淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星耐药基因研究

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声明

前言

1材料和方法

1.1标本的收集

1.2主要试剂及药品

1.3主要仪器

1.4主要试剂配制

1.5实验方法

2结果

2.1药敏试验结果

2.2 PCR扩增产物电泳分析结果

2.3 gyrA基因序列分析结果

3讨论

结论

参考文献

淋病奈瑟菌对氟喹诺酮类药物耐药性研究进展

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致谢

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摘要

目的:了解临汾地区淋病奈瑟菌对环丙沙星的耐药性及其与gyrA基因QRDR(喹诺酮类耐药决定区)之间的关系,为探索建立快速、有效的淋病奈瑟菌耐药菌株基因检测方法提供依据。 方法:采集33例临汾地区淋病奈瑟菌感染病例标本,通过分离、鉴定、纯培养,以及K-B纸片法药物敏感试验筛选出对环丙沙星耐药菌株33株,设计对应于淋球菌gyrA上QRDR区基因片段的引物,经过聚合酶链式反应(PCR)扩增其目的基因片段,并对扩增产物进行DNA序列测定,明确gyrA基因突变的情况。 结果: 33株淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星全部耐药:所有耐药菌株均经PCR扩增出大小为225bp(对应于QRDR)的基因片段;测序结果显示耐药菌株都发生了91位点突变(Ser-91→Phe),其中单独91位点突变的有3株,发生91和95双位点突变的有30株,95位点突变类型有三种:Asp-95→Gly,Asp-95→Asn,Asp-95→Ala,以Asp-95→Gly最为常见,有19株,占gyrA 95位点突变株的63.3%。 结论: 临汾地区淋病奈瑟菌临床流行株对环丙沙星的耐药情况很严重;gyrA基因突变在淋病奈瑟菌对环丙沙星耐药中起着重要作用;对环丙沙星耐药的淋球菌gyrA基因突变位点和突变类型比较稳定;应用PCR和DNA测序技术可以快速准确地检测gyrA基因的突变,为临床诊断提供更有效的理论依据。

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