荧光原位杂交技术(FISH)检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增的临床意义

摘要

宫颈癌为最常见的妇女恶性肿瘤之一，发病率在全球居第二位，仅次于乳腺癌。我国是宫颈癌高发国家，其中山西省为高发地区之一，且近年来发病有明显的年轻化趋势，严重威胁着女性的健康和生命。目前宫颈癌的筛查主要包括宫颈脱落细胞学检查及HPV检测，但各种方法都存在局限性，所以迫切需要寻找其它可靠的指标或手段来协助以上检查。众多研究表明，人类大多数恶性肿瘤的发生发展常与染色体的不稳定性有关，并有研究发现端粒酶的激活是宫颈癌形成的早期事件，且其激活程度与宫颈病变程度呈正相关。TERC基因定位于三号染色体长臂(3q，26.3)，主要的作用是编码端粒酶复合物中RNA成分，该成分为合成端粒重复序列的模板，是端粒酶活性必需的核心组分之一。因此，TERC基因作为端粒酶活性成分的编码基因，对其进行检测将有助于宫颈癌的筛查及早期诊断。目前检测这一基因的标准方法即荧光原位杂交(FISH)技术。本课题拟通过FISH技术检测不同程度宫颈病变中TERC基因的扩增情况，以期为宫颈癌的筛查、早期诊断及预后评估提供新的途径。 目的：评估液基细胞学检查在宫颈病变筛查中的临床意义，并应用FISH技术检测不同程度宫颈病变中TERC基因的表达情况，以期为宫颈癌的筛查、早期诊断及预后评估提供新的途径。 方法：收集2008年6月-2009年1月在山西医科大学第一附属医院妇产科门诊，自愿行TCT检查的患者资料，其中TCT阳性者(即：TBS分级系统在ASCUS及其以上病变者)行阴道镜检查并取活检进行病理诊断。以组织病理学为金标准，与液基细胞学诊断进行比较分析，评估液基细胞学的诊断价值。并于TCT阳性标本中随机抽取标本100例做为实验组，按细胞学检查结果分为ASCUS、LSIL、HSIL三组，同时随机抽取同期TCT检查结果正常标本20例做为对照组。利用FISH技术检测各组中TERC基因的扩增情况，观察随着宫颈病变程度的发展，TERC基因的表达情况及变化趋势，并将液基细胞学检查与FISH检测TERC基因进行比较。统计学分析使用SPSS13.0统计软件，采用x2检验，P＜0.05差异有统计学意义，并以组织病理学诊断为金标准，用敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、误诊率、漏诊率及总符合率等指标评价两种方法在宫颈病变中的诊断价值。 结果： 1．共收集TCT标本4285例，TCT阳性者为462例，总阳性检出率为10.78％。其中ASCUS/AGUS268例，占6.25％；LSIL133例，占3.10％；HSIL61例，占1.42％。行阴道镜检取活检者405例，以病理检查为金标准，计算出各组检出率分别为ASCUS25.09％(63/251)、LSIL62.37％(58/93)、HSIL96.29％(52/54)、CC100％(7/7)。各组间相比，差异有统计学意义(P＜0.05)。TCT检测CINⅡ以上病变的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、漏诊率、误诊率、总符合率分别为62.5％、98.11％、90.16％、90.41％、37.5％、9.84％、85.43％；TCT检测CINⅠ以下病变的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、漏诊率、误诊率、总符合率分别为39.02％、84.30％、47.76％、78.99％、60.98％、52.24％、72.13％。表明TCT对CINⅡ以上病变的诊断价值较高。 2．利用FISH技术对对照组进行检测后，计算每例标本中异常细胞所占比例并取平均值，数据用均数±标准差表示，为8％±1.3，建立了判断TERC基因阳性扩增的阈值为10％。经FISH检测发现ASCUS组、LSIL组、HSIL组中TERC基因阳性扩增率分别为19.51％、34.29％、91.30％。将FISH检测结果与病理检查结果进行比对，发现组织学正常组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组、宫颈癌组中TERC基因阳性扩增率分别为8.47％、21.43％、40％、78.78％、100％。正常组、CINⅠ组、CINⅡ组分别与CINⅢ以上组相比，差异有统计学意义(P＜0.05)。FISH检测TERC基因诊断CINⅡ以上病变的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、漏诊率、误诊率、总符合率分别为72.34％、89.04％、80.95％、83.33％、27.66％、19.05％、82.5％；FISH检测TERC基因诊断CINⅠ以下病变的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、漏诊率、误诊率、总符合率分别为21.42％、91.53％、37.5％、83.07％、78.57％、62.5％、78.08％。FISH检测TERC基因对CINⅡ以上病变的诊断价值较高。 3．将液基细胞学检查与FISH检NTERC基因进行比较，发现FISH检NTERC基因诊断CINⅠ以上病变的特异性、阳性预测值、阴性预测值、总符合率均高于TCT检查，误诊率低于TCT检查，显示出较好的诊断价值。 结论： 1．宫颈病变程度越高，液基细胞学检查的检出率越高；2．TERC基因在宫颈癌前病变和宫颈癌中异常表达，FISH检NTERC基因的阳性表达率随宫颈病变程度的加重而增加；3．与液基细胞学检查相比，FISH检NTERC基因具有敏感性、特异性高，误诊率低的特点，诊断价值更高；4．FISH检测TERC基因可能为监测宫颈癌前病变进展的生物学指标。

目录

文摘

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声明

前言

第一章液基细胞学检查在宫颈病变筛查中的临床意义

1.1资料与方法

1.2结果

1.3.讨论

第二章FISH检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增情况的临床意义

2.1.材料和方法

2.2结果

2.3讨论

附图

结论

参考文献

综述荧光原位杂交技术在妇科肿瘤中的应用

个人简历

致谢