GnRH-a醋酸曲谱瑞林对人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B增殖抑制及对P21、PCNA表达的影响

摘要

目的：通过探讨醋酸曲谱瑞林(triptorelinacetate)对人子宫内膜癌细胞的增殖抑制及对P21、PCNA表达的影响及二者的相关关系，来探讨其对子宫内膜癌细胞的作用机制。 方法：1、体外培养子宫内膜癌细胞株HEC-1B。2、绘制HEC-1B细胞的生长曲线。3、应用MTT方法检测对照组、药物干预组干预24、48、72、96h后的吸光度值，计算细胞抑制率。4、利用RT—PCR技术与免疫细胞化学方法分别检测不同浓度醋酸曲谱瑞林(10-9～10-5mmol/L)干预72h后p21、PCNA基因在转录及翻译水平的表达，并与对照组进行比较。 结果：1、MTT绘制细胞生长曲线结果显示：醋酸曲谱瑞林作用于细胞的生长曲线呈S形。2、MTT增殖实验结果显示：醋酸曲谱瑞林作用于细胞后，作用相同时间后不同浓度之间抑制率均有差异，浓度越高，抑制率越大；且相同浓度药物作用不同时间后抑制率差异有统计学意义，作用时间越长抑制率越大(P＜0.05)。3、免疫细胞化学结果显示不同浓度醋酸曲谱瑞林作用于子宫内膜癌细胞72h后，与对照组比较，p21表达增强，PCNA表达减弱，统计学差异显著(P＜0.05)。4、RT—PCR结果显示不同浓度醋酸曲谱瑞林作用于子宫内膜癌细胞72h后，与对照组比较，P21mRNA表达增强，PCNAmRNA表达减弱，且呈明显的负性相关关系，统计学差异显著(P＜0.05)。 结论：1、醋酸曲谱瑞林能有效抑制人子宫内膜癌HEC-1B细胞株体外增殖，且呈时间、浓度依赖性。2、免疫细胞化学和RT—PCR结果分析显示：醋酸曲谱瑞林干预子宫内膜癌HEC-1B细胞株72h后P21表达上调，PCNA表达下调，且呈负相关关系。表明醋酸曲谱瑞林可能是通过上调P21或(和)下调PCNA表达，来发挥对子宫内膜癌细胞的增殖抑制作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文名称缩略词

声明

前 言

第一部分 材料与方法

1人子宫内膜癌HEC-1B细胞株

2试剂

3主要仪器

4实验方法

第二部分 实验结果

1 MTT(四甲基偶氮唑蓝微量酶反应)绘制细胞生长曲线

2免疫细胞化学检测细胞P21及PCNA蛋白

3半定量RT-PCR测定子宫内膜癌细胞HEC-1B中P21及PCNAmRNA的表达

4醋酸曲普瑞林干预后HEC-1B细胞中P21、PCNA表达的相关性

第三部分 讨 论

第四部分 结 论

参考文献

附 录

第一章文献综述

作者简介

致 谢