夏天无对脑梗死大鼠循环内皮细胞和血清髓鞘碱性蛋白影响的实验研究

摘要

目的：根据中西医对脑梗死(Cerebral Infarction，CI)发病机制的深入研究，以及中药夏天无(Rhizoma Corydalis Decumbentis，RCD)的研究进展，本实验用治疗脑梗死有效的药物维脑路通作为对照药，通过观察夏天无对脑梗死模型大鼠循环内皮细胞(CirculationEndothelial Cells，CEC)、血清髓鞘碱性蛋白(Myelin Basic Brotein，MBP)及脑组织病理形态学的影响，探讨其治疗脑梗死的可能机制，以指导临床用药。
　　 方法：
　　 1健康雄性Wistar大鼠60只，体重225±25g，随机抽取16只，再随机分为两组，即正常组与假手术组，每组8只，其余44只采用线栓大脑中动脉闭塞(MCAO)法制造脑梗死模型大鼠，除去死亡的两只和造模未成功的6只，为了保持各组样本的一致，减少系统误差，将造模成功的36只去掉首位各两只，其余32只随机分成4个组，即模型组、高剂量子、低剂量组和维脑路通对照组，每组8只。
　　 2各组均于手术前一天禁食，于手术第二天给药，给药7天后取各项指标。
　　 3正常组、假手术组、模型组分别以生理盐水6ml/Kg/d，灌胃7天；高剂量组：夏天无9.6g/Kg/d，灌胃7天(为低剂量组的4倍)；低剂量组：夏天无2.4g/Kg/d，灌胃7天(按照成人公斤体重日正常量的20倍)；维脑路通对照组：维脑路通片144mg/kg/d，灌胃7天(按照成人公斤体重日正常量的20倍)。
　　 4各组经相应处理后，腹主动脉采血用Percoll密度梯度分离法测定各组大鼠的血浆CEC数目，用ELISA双抗夹心法测定血清MBP，断头取脑后用HE染色观测脑组织病理形态学的变化。
　　 结果：
　　 1 Percoll密度梯度分离法测定CEC数目模型组和正常组及假手术组的CEC数目比较有显著统计学意义(P＜0.001)；夏天无高剂量组、低剂量组和维脑路通组的CEC数目均较模型组降低，具有明显统计学意义(P＜0.01)，且高剂量组较维脑路通组和低剂量组CEC数目降低更明显(P＜0.05)，低剂量组和维脑路通组以及正常组与假手术组的比较无统计学意义(P＞0.05)。
　　 2 ELISA法测定血清MBP浓度模型组和正常组及假手术组的MBP浓度比较有显著统计学意义(P＜0.01)；夏天无高剂量组、低剂量组和维脑路通组的MBP浓度均较模型组降低，有统计学意义(P＜0.05)，且高剂量组较维脑路通组和低剂量组MBP浓度降低更明显(P＜0.05)，低剂量组和维脑路通组以及正常组与假手术组的比较无统计学意义(P＞0.05)。
　　 3夏天无对脑梗死大鼠脑组织病理形态学的影响假手术组和正常组动物大脑和小脑神经细胞正常，核仁、核膜、细胞膜均清楚;神经胶质细胞正常，核仁、核膜均清楚;胞浆透亮或淡染。模型组动物脑实质内多量神经细胞变性甚至坏死，表现为核固缩，胞浆深蓝染，核内结构不清，胞体萎缩变小，神经突呈锐角状，有的核仁核膜消失，核溶解;神经胶质细胞肿胀。高剂量组、低剂量组以及维脑路通对照组动物脑神经细胞与神经胶质细胞的病理改变均明显减轻，坏死细胞减少，神经细胞核溶解现象消失。其中高剂量组的作用最明显，低剂量组与维脑路通对照组的作用相似。
　　 结论：
　　 1线栓大脑中动脉闭塞法(MCA0)可以成功复制脑梗死大鼠模型。
　　 2夏天无治疗脑梗死的机制与减少脑血管内皮细胞的凋亡有关。
　　 3夏天无对脑梗死的脑保护作用可以在脑细胞的变性、坏死组织学中得以证实。
　　 4夏天无治疗脑梗死的作用，高剂量优于低剂量。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

前言

材料与方法

1.1材料

1.1.1动物

1.1.2药品与试剂

1.1.3实验用仪器

1.2方法

1.2.1模型制备方法

1.2.2脑梗死模型成功的判定标准

1.2.3动物分组及处理

1.2.4采集标本

1.2.5指标检测

1.2.6统计学处理

结果

2.1造模各组神经功能评分值

2.2夏天无对脑梗死大鼠循环内皮细胞(CEC)的影响

2.3夏天无对脑梗死大鼠血清髓鞘碱性蛋白(MBP)的影响

2.4夏天无对脑梗死大鼠脑组织病理形态学的影响

讨论

结论

参考文献

附图

综述 脑梗死的研究进展

个人简历

致谢